[發明專利]一種天然L-α-甘油磷脂酰膽堿的制備方法

有效

• 申請號: 201210513309.1
• 申請日: 2012-11-30
• 公開（公告）號: CN102964377A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發明（設計）人: 張小里;李紅亞;梁江;張希雙;趙彬俠
• 申請（專利權）人: 西北大學
• 主分類號: C07F9/09
• 分類號: C07F9/09
• 代理公司: 西安恒泰知識產權代理事務所 61216
• 代理人: 林兵

技術領域

本發明涉及醫藥、功能性食品行業和催化技術領域，具體涉及一種天然L-α-甘油磷脂酰膽堿的制備方法。

背景技術

L-α-甘油磷脂酰膽堿（L-α-glycerophosphocholine，以下簡稱GPC）是人體內天然存在的一種獨特的水溶性磷脂。研究表明，GPC不僅可以提高不同階段人群的記憶能力和認知能力，尤其對老年人，能有效地預防和治療老年癡呆癥，并對老年人的腦中風現象有一定抑制作用；同時，它還能促進人體生長激素的釋放，在一定程度上能使青少年的身高有所改善，也能有效地調節中年人的荷爾蒙平衡，起到美容、減緩衰老的效果。因此，GPC可被廣泛地應用于醫藥、保健品及功能性食品行業。

近年來，已經出現了一些含有GPC及其它天然磷脂脫酰基物的功能性保健品，但國內外廠家大多采用化學合成的方法生產GPC。EP0486100通過D-亞異丙基甘油與2-氧-2-氯-1,3-二環氧磷戊烷反應后再與三甲胺開環縮合，此過程所用的原料不穩定，同時反應過程中需要加壓操作，條件苛刻。EP0502357則先將D-亞異丙基甘油與對甲苯磺酰氯在0°C下反應18h，得到亞異丙基甘油對甲苯磺酸酯，再與磷酸膽堿四甲基銨鹽縮合反應，水解后即可得到產物GPC，此法雖然避免了加壓操作的問題，但依然存在原料不穩定，工藝復雜且成本較高的問題。CN101544667A公開的方案是先將縮水甘油制成縮水甘油對甲苯磺酸酯后，再與磷酸膽堿四乙基銨鹽縮合來制備GPC，避免了原料縮水甘油純化難的缺陷，但反應工藝比較復雜，總收率較低。WO2007145476公開的方案是利用2,3-環氧-1-丙醇與磷酸膽堿在異丙胺存在的條件下，進行親核加成反應來制備GPC，取得了一定的收效，但過程中對原料純度要求較高，且反應收率低。通常，通過化學法合成GPC的工藝復雜、收率低、且多使用了有毒的化學原材料，其產物用于食品及醫藥方面存在很大的安全隱患。

從大豆卵磷脂或蛋黃卵磷脂等天然原料經水解脫去脂肪側鏈而得到GPC是其作為醫藥保健品及功能性食品添加劑的更有利的制備途徑，與化學法相比，副反應較少，產物更天然。US2864848公開的方案采用水溶性汞鹽作催化劑，將磷脂乳化液在沸騰條件下水解制備GPC，原料雖天然，但產物收率低，且分離有毒的汞鹽工藝復雜。EP0217765和WO90/13552公開的方案均采用甲醇鈉作為催化劑，通過醇解大豆卵磷脂制備GPC，該過程對原料要求較高，少量水的存在便會發生皂化反應，同時產品分離過程中使用了大量有機溶劑和水，既增加了成本，又造成了環境污染。文獻[Chem.Phys.lipid.4.104(1970)]報道了以氫氧化四丁基銨為酯交換反應催化劑的工藝，雖然較汞鹽溫和，但四丁基銨鹽的殘留仍影響產品的食用安全性。CN102516292A公開的方案是以低沸點胺作為催化劑，由天然磷脂反應制備GPC，反應條件溫和、時間短、產物純度高，且催化劑可通過蒸餾方式和甲醇一起回收使用，簡化了制備工藝，但低沸點胺仍不具備完全無毒的特性，甲醇的大量使用對生產過程及產物的安全性存在一定威脅；同時該工藝中乙醚作為溶劑存在生產安全隱患。

發明內容

針對現有以天然卵磷脂為原料制備GPC工藝中存在的催化劑有毒、溶劑乙醚使用危險、反應物甲醇對工藝及產品存在安全性隱患等問題。本發明在大量實驗研究的基礎上，提出了一種天然L-α-甘油磷脂酰膽堿的制備方法。該制備方法以氫氧化膽堿為催化劑，甲基叔丁基醚作為溶劑，通過磷脂酰膽堿與無毒低碳醇進行酯交換反應，得到GPC或以GPC為主的天然磷脂脫酰基物。

為了達到上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種天然L-α-甘油磷脂酰膽堿的制備方法，具體制備過程如下：

將已知磷脂酰膽堿含量的天然卵磷脂溶于甲基叔丁基醚，濾去不溶物后調節溫度至5～55°C；在該溫度條件下，按照無水低碳醇與磷脂酰膽堿摩爾比為3:1～600:1，加入無水低碳醇和催化劑氫氧化膽堿，使反應體系中氫氧化膽堿的用量為每升1～30mmol，攪拌反應0.25～4個小時；反應結束后倒掉上清液，將油狀沉淀物用無水乙醇溶解，并用甲基叔丁基醚進行沉淀，沉淀完全后棄去上清液，再反復用無水乙醇溶解并用甲基叔丁基醚沉淀2～3次，將得到的油狀產物在五氧化二磷存在的條件下進行真空干燥，即得到以甘油磷脂酰膽堿為主的天然磷脂脫酰基物的混合物。

進一步的，所述無水低碳醇采用甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇或者異丁醇中的一種。

進一步的，所述天然卵磷脂來自大豆、蛋黃或動物內臟的提取物，其中磷脂酰膽堿的含量為20%～98%。