[發(fā)明專利]一種微藻油脂提取方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210511744.0
• 申請(qǐng)日: 2012-12-04
• 公開（公告）號(hào): CN102942991A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 殷學(xué)軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳國能環(huán)保節(jié)能科技有限公司
• 主分類號(hào): C11B1/10
• 分類號(hào): C11B1/10;C11B1/02
• 代理公司: 深圳市合道英聯(lián)專利事務(wù)所(普通合伙) 44309
• 代理人: 朱思全

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物工程領(lǐng)域，尤其是涉及一種微藻油脂提取方法。

背景技術(shù)

進(jìn)入21世紀(jì)以來，能源危機(jī)從未像今天這樣迫在眉睫。石油作為一種不可再生的資源，供應(yīng)日趨緊張，尋找可替代的能源是人類迫切要解決的問題。與此同時(shí)，工業(yè)的高速發(fā)展帶來的二氧化碳巨量排放所導(dǎo)致的換將和氣候問題已經(jīng)嚴(yán)重威脅到人類的后續(xù)生存。人們被迫思考，在我們享受工業(yè)文明的時(shí)候，我們是否還能存在下去。

由于石化能源的日益枯竭及其所帶來的環(huán)境污染問題，使得開發(fā)可再生能源成為當(dāng)今世界的研究熱點(diǎn)。微藻既是生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品和生物活性物質(zhì)的潛力資源，又是進(jìn)行生物能源研究的重要原料。與其他能源植物相比，微藻生物質(zhì)中的油脂含量高，單位面積產(chǎn)量最高，可達(dá)陸生油料作物的30倍以上?，因此被認(rèn)為是未來生物能源供應(yīng)的重要原料。

201010607927.3號(hào)發(fā)明專利公開了一種將微藻粉在甲醇、乙酸或者它們的混合溶劑中浸取，然后將甲醇、乙酸或者它們的混合物蒸發(fā)，以得到微藻油脂的方法。但是這種方法，在不破碎細(xì)胞壁的前提下用萃取劑進(jìn)行提取，因?yàn)榧?xì)胞壁不受破壞，細(xì)胞中的油脂內(nèi)含物不能流露出去，萃取難度大，效率也不高。201010593183.4號(hào)發(fā)明專利公開了一種以產(chǎn)油微生物發(fā)酵醪液為原料，經(jīng)過酶解、有機(jī)溶劑浸提得到微生物油脂的方法。根據(jù)其摘要的說法，浸提率最高可達(dá)100%。可是廣泛的實(shí)施和驗(yàn)證，證明其根本不符合事實(shí)，因?yàn)槊附夥ㄆ瞥?xì)胞壁，首先酶作用的原理是與反應(yīng)物進(jìn)行靶合，從而促使發(fā)生反應(yīng)，發(fā)酵液里面，酶的用量須相當(dāng)大才能達(dá)到使無數(shù)個(gè)10⁹量級(jí)的細(xì)胞壁發(fā)生反應(yīng)。且酶的催化受反應(yīng)條件限制，反應(yīng)中PH值、產(chǎn)物濃度、溫度等等多種限制，根本不可能完全催化。更重要的，單一性的酶液，對(duì)于工業(yè)生產(chǎn)來講，成本相當(dāng)高。而常規(guī)的破碎及提取方法中，破碎率一般較低，造成細(xì)胞浪費(fèi)，效果也難理想

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明提供一種微藻油脂提取方法，所述方法包括下列步驟：

（1）將微藻發(fā)酵繆液進(jìn)行離心，收集分離之后的藻體細(xì)胞；

（2）將步驟1中所得到的藻體細(xì)胞用緩沖液洗滌，再制成待用藻液；

（3）細(xì)胞破碎：將上述步驟2制得的藻液進(jìn)行2-3次反復(fù)凍融，并且在融化的同時(shí)，加超聲波場；

（4）將步驟3中所得到的原液，用索氏提取裝置采用萃取劑（丙三醇：乙醇：石油醚=0.5:6.5:3）進(jìn)行提取，提取條件為：

A、萃取劑與原液體積比為4：1-8:1的比例混合裝入反應(yīng)釜中；

B、將提取溫度控制為80^OC；

C、提取時(shí)間為3h；

（5）烘吹除去步驟4中得到的含有油脂的萃取混合液中的萃取劑。

步驟1所述微藻發(fā)酵繆液在3500rpm的離心機(jī)內(nèi)離心20-30分鐘。

步驟2所述緩沖液為PH6.5-7.0的PBS緩沖液。

步驟3中的凍融條件為：-10^OC進(jìn)行冷凍3h，常溫解凍0.5h。

步驟3中的超聲波為25KHz的超聲波，破碎時(shí)間4s，間隔時(shí)間5s。

采用本發(fā)明的微藻油脂提取方法，油脂的浸提率可以達(dá)到90%以上，且相對(duì)于現(xiàn)有的方法，其溫度、能耗功率較低，提取條件最適，適合工業(yè)擴(kuò)展，成本低，產(chǎn)率高。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明的目的，使得技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。

本發(fā)明提供一種微藻油脂提取方法，所述方法包括下列步驟：

（1）將微藻發(fā)酵繆液進(jìn)行離心。將微藻發(fā)酵繆液在3500rpm的離心機(jī)內(nèi)離心20-30分鐘，收集分離之后的藻體細(xì)胞。

（2）將步驟1中所得到的藻體細(xì)胞用PH6.5-7.0的PBS緩沖液洗滌2-3次，再制成待用藻液。

（3）細(xì)胞破碎：將上述步驟2制得的藻液進(jìn)行反復(fù)凍融，并且在融化的同時(shí)，加超聲波場。凍融條件為：-10^OC進(jìn)行冷凍，冷凍3h，常溫解凍0.5h；在融化的過程中，施加25KHz的超聲波，破碎時(shí)間4s，間隔時(shí)間5s。凍融循環(huán)次數(shù)為2-3次。

（4）提?。簩⒉襟E3中所得到的原液，用索氏提取裝置采用本發(fā)明獨(dú)特配置的萃取劑（丙三醇：乙醇：石油醚=0.5:6.5:3）進(jìn)行提?。?/p>

A、萃取劑與原液體積比為4：1-8:1的比例混合裝入反應(yīng)釜中；

B、將提取溫度控制為80^OC；

C、提取時(shí)間為3h。