[發明專利]一種枝孢菌株及其微生物菌劑以及制備方法和應用

無效

• 申請號: 201210511017.4
• 申請日: 2012-12-03
• 公開（公告）號: CN103013836A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 萬金泉;黃蓉姿;馬邕文;王艷;吳鳳環
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C02F3/34;C12R1/645;C02F101/34
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 宮愛鵬

1.一種枝孢菌株，其特征在于，所述菌株為枝孢屬（Cladosporium?sp.）HRZ008，由中國典型培養物保藏中心保藏，其簡稱為CCTCC，保藏編號是CCTCC?No:M2012363，保藏日期為2012年9月19日。

2.一種微生物菌劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）菌種活化：挑取枝孢菌株HRZ008至菌種保藏培養基，30℃平板劃線、挑取單菌落培養兩次后，挑取少量接種于活化培養基中，于30℃、180r/min搖床震蕩培養24h；

（2）液態發酵：向裝有滅菌后的種子培養基中，按照10%的接種量接種枝孢菌株HRZ008，于30℃下，通空氣培養48h，得到活菌體發酵液；

（3）菌劑制備：培養好的發酵液經OD₆₀₀測定后，超濾濃縮，調節其吸光度至1.0，加入甘油保藏即可。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述菌種保藏培養基為：馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g，加水至1L，調節pH=7.0，在121℃下滅菌20min。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述菌種活化培養基為：馬鈴薯200g、葡萄糖20g、加水至1L，調節pH=7.0，在115℃下滅菌15min。

5.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述種子培養基為：80目以下的微晶纖維素1.0g、CO(NH₂)₂8.0mg、NH₄Cl?14.3mg、KH₂PO₄6.6mg、MgSO₄·7H₂O?30.0mg、CoCl₂·6H₂O?20.0mg、NaHCO₃20.5mg、CaCl₂12.9mg、MnSO₄·H₂O?2.1mg、FeSO₄·7H₂O?10.4mg、ZnCl₂5.5mg，調節pH=7.0，在115℃下滅菌15min。

6.權利要求2~5任意一項方法制得的微生物菌劑。

7.權利要求1所述菌株HRZ008在降解廢水中纖維素的應用。

8.根據權利要求7所述應用，其特征在于，所述菌株能使廢水中的羧甲基纖維素、微晶纖維素和濾紙有效降解。

9.根據權利要求8所述應用，其特征在于，將權利要求2~5任意一項方法制得的微生物菌劑先用水稀釋，然后用于降解廢水中纖維素。

10.根據權利要求7或8或9所述的應用，其特征在于，所述菌株的降解的培養基為如下3種中的任意一種：

所述羧甲基纖維素-剛果紅固體培養基為1L：CMC?2.0g、剛果紅0.2g、K₂HPO₄0.5g、(NH₄)₂SO₄2.0g、MgSO₄·7H₂O?0.25g、瓊脂20g，調節pH=7.0；

所述微晶纖維素-剛果紅固體培養基為1L：200目以下的微晶纖維素1.0g、剛果紅0.2g、K₂HPO₄0.5g、(NH₄)₂SO₄2.0g、MgSO₄·7H₂O?0.25g、瓊脂20g，調節pH=7.0；

所述菌株降解的液體培養基為1L：200目以下的微晶纖維素1.0g或質量為50±0.5mg的濾紙條10條、K₂HPO₄0.5g、(NH₄)₂SO₄2.0g、MgSO₄·7H₂O0.25g，調節pH=7.0。