[發明專利]一種纖花線紋香茶菜的有效成分檢測方法

有效

• 申請號: 201210506796.9
• 申請日: 2012-11-30
• 公開（公告）號: CN103852526A
• 公開（公告）日: 2014-06-11
• 發明（設計）人: 匡艷輝;林青;黃琳;姚小華;王德勤
• 申請（專利權）人: 廣州白云山和記黃埔中藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產權代理事務所(普通合伙) 11382
• 代理人: 李渤;張偉

技術領域

本發明屬于中藥材檢測領域，具體涉及一種纖花線紋香茶菜有效成分的檢測方法。

背景技術

纖花線紋香茶菜屬唇形科香茶菜屬植物（Isodon?lophanthoides??(Buch.?-Ham.?ex?D.?Don)?Hara?var.graciliflora?(Benth.)?H.?Hara），為中藥溪黃草的來源之一，其具有清熱利濕、退黃祛濕、涼血散瘀的功效，可以用于治療急性黃疸型肝炎、急性膽囊炎、痢疾、腸炎等病癥，是我國南方地區治療乙型肝炎的常用草藥。目前，纖花線紋香茶菜雖然使用廣泛，但是查閱大量資料發現，《中國藥典》歷版均未收載。《廣東省中藥材標準》2011版和《廣西省中藥材標準》收載的纖花線紋香茶菜質量鑒別主要是通過考察其性狀和薄層色譜法鑒別，單一依靠性狀和薄層鑒別難以確定纖花線紋香茶菜中有效成分的含量，辨別其質量優劣，但目前尚未發現有關纖花線紋香茶菜有效成分的文獻報道。

發明內容

為了解決上述問題，本發明的目的是提供一種纖花線紋香茶菜的有效成分檢測方法，該檢測方法是通過高效液相色譜法成功地實現了對纖花線紋香茶菜中黃酮類和迷迭香酸有效成分含量的同時測定，能夠用來表征纖花線紋香茶菜的藥材質量。

本發明的上述目的是通過以下技術方案來實現的：

一種纖花線紋香茶菜有效成分的檢測方法，該檢測方法包括采用高效液相色譜法測定纖花線紋香茶菜中異夏佛塔苷、夏佛塔苷和迷迭香酸的含量，其中，所述高效液相色譜法的條件包括：

色譜柱：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑C18反相色譜柱；

流動相：流動相A為甲醇，流動相B為0.1%（體積）的磷酸水溶液，進行梯度洗脫；

所述梯度洗脫程序如下，其中流動相的比例均為體積百分比：

0~30min，流動相A為30%，流動相B為70%；

30~70?min，流動相A為30%→50%，流動相B為70%→50%。

優選地，所述高效液相色譜法的條件還包括：

流動相流速：?0.5~1.5?ml/min；優選為1ml/min；

色譜柱柱溫：?15~40℃；優選為15~35℃；

紫外檢測波長：?200~400nm；優選為270nm。

優選地，在上述檢測方法中，上述高效液相色譜法的供試品溶液按照以下步驟來制備：

取纖花線紋香茶菜1g，置于100ml錐形瓶，加入提取溶劑25ml，超聲提取30min，冷卻，定容，過濾，取續濾液過0.22μm的微孔濾膜即得；

優選地，所述提取溶劑選自70%（體積）甲醇水溶液、50%（體積）甲醇水溶液或無水甲醇。

優選地，在上述檢測方法中，上述高效液相色譜法的對照品溶液按照以下步驟來制備：

取異夏佛塔苷對照品10mg，置于100ml容量瓶中，加入70%（體積）甲醇水溶液溶解，定容，制成濃度為0.15mg/ml的溶液，作為對照品溶液；

取夏佛塔苷對照品10mg，置于100ml容量瓶中，加入70%（體積）甲醇水溶液溶解，定容，制成濃度為0.15mg/ml的溶液，作為對照品溶液；

取迷迭香酸對照品10mg，置于100ml容量瓶中，加入70%（體積）甲醇水溶液溶解，定容，制成濃度為0.15mg/ml的溶液，作為對照品溶液。

具體而言，上述纖花線紋香茶菜有效成分的檢測方法包括以下步驟：

1）制備供試品溶液：

取纖花線紋香茶菜1g，置于100ml錐形瓶，加入提取溶劑25ml，超聲提取30min，冷卻，定容，過濾，取續濾液過0.22μm的微孔濾膜即得；

優選地，所述提取溶劑選自70%（體積）甲醇水溶液、50%（體積）甲醇水溶液或無水甲醇。

2）制備對照品溶液：

取異夏佛塔苷對照品10mg，置于100ml容量瓶中，加入70%（體積）甲醇水溶液溶解，定容，制成濃度為0.15mg/ml的溶液，作為對照品溶液；

取夏佛塔苷對照品10mg，置于100ml容量瓶中，加入70%（體積）甲醇水溶液溶解，定容，制成濃度為0.15mg/ml的溶液，作為對照品溶液；

取迷迭香酸對照品10mg，置于100ml容量瓶中，加入70%（體積）甲醇水溶液溶解，定容，制成濃度為0.15mg/ml的溶液，作為對照品溶液；

3）采用高效液相色譜法測定纖花線紋香茶菜中黃酮類化合物和迷迭香酸的含量：