[發明專利]MUC1自身抗體識別的抗原多肽

有效

• 申請號: 201210506768.7
• 申請日: 2012-11-30
• 公開（公告）號: CN103848890A
• 公開（公告）日: 2014-06-11
• 發明（設計）人: 岳文濤;張麗娜;顧勐;趙曉婷;王玥
• 申請（專利權）人: 北京市結核病胸部腫瘤研究所
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;G01N33/68
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

技術領域

本發明涉及生物醫學領域。具體地，本發明涉及MUC1自身抗體識別的抗原多肽及其用途。更具體地，本發明涉及一種MUC1自身抗體識別的抗原多肽、該多肽在制備檢測腫瘤血清MUC1抗體的用途、一種用于檢測樣品中MUC1抗體的試劑盒。

背景技術

肺癌生物學特性十分復雜、惡性程度高且隱匿性強，高死亡率的關鍵性因素在于缺乏有效的早期診斷。眾所周知，肺癌的預后與診斷時該病的分期密切相關。肺癌患者在不同的腫瘤分期，其5年存活率如下：I期5年存活率60-70%，II期5年存活率40-50%，IIIB期和IV期為5-20%。大部分肺癌在無痛期（大約8年）是沒有臨床癥狀，同時，臨床上仍沒有有效的篩查方法能發現早期肺癌，臨床常用幾種肺癌標志物，如神經元特異性烯醇化酶（NSE）、胃泌素釋放肽前體（pro-GRP）、細胞角蛋白19（CYFRA21-1）、p53抗體和癌胚抗原(CEA)等，也沒有一個腫瘤標志物對早期肺癌的發現有足夠的敏感性、特異性和可重復性，因此制約了我們對早期肺癌進行有效篩選。因此，我們認為迫切需要尋找有效腫瘤相關標志物用于肺癌早期診斷。

腫瘤自身抗體是在腫瘤的惡變過程中，因新的蛋白質產生，同時某些蛋白質被過度表達，從而激發機體的免疫應答，產生多種針對自身抗原和腫瘤抗原的抗體，雖然其產生機制及作用并不清楚，但這些自身抗體的存在表明體液免疫識別腫瘤抗原中起著一定的作用。相較于血清中腫瘤抗原型標志物，血清中腫瘤抗原相應自身抗體具有豐度高，出現早，易檢測等優勢，可能成為更為可靠的血清腫瘤標志物。

MUC1是一種膜結合型黏蛋白，在許多組織的上皮細胞表面都有豐富表達，對正常的上皮起潤滑和保護作用；同時，MUC1可和多種分子相互作用，從而影響細胞的生理生化功能。MUC1的異常表達也是多種癌癥的一個顯著特性，由于MUC1在多種腫瘤中異常表達，主要包括（1）表達量增加，可達正常時的100倍以上；（2）細胞表面分布的改變，極性分布喪失，整個細胞表面均表達；（3）結構改變，主要由于糖基化不全，出現異常糖基化和異常肽表位，使其成為一種潛在的腫瘤相關標志物。針對它在腫瘤細胞中異常表達的特點，推測其自身抗體表達水平的檢測可能更能反映這種變化。然而目前針對MUC1自身抗體的檢測，大多使用MUC1全長蛋白，而全長純蛋白的制備和純化過程較為復雜，難度較大，大大增加了檢測成本；且全長蛋白檢測自身抗體時表位曝露不佳，使檢測的敏感性和特異性均不理想，因此，尋找更為理想的抗原表位多肽代替全長蛋白無疑成為了一個有效的解決途徑。

發明內容

本發明旨在解決現有MUC1自身抗體檢測試劑盒中MUC1純蛋白表達、純化難度高，試劑盒成本高、檢測敏感性低的缺陷，而提供一種有用的商業選擇。

本發明的另一目的在于提供上述MUC1自身抗體識別的抗原多肽在制備腫瘤檢測試劑盒中的應用。

本發明的另一目的在于提供上述MUC1自身抗體識別的抗原多肽檢測腫瘤MUC1自身抗體試劑盒。

為此，本發明提出了如何獲得有效的MUC1自身抗體識別的抗原多肽方法，并進一步提供了能夠有效地檢測樣品中MUC1自身抗體的手段。

由此，本發明提出了一種MUC1自身抗體識別的抗原多肽。根據本發明的實施例，其多肽活性片段為下列至少之一：

1)SEQ?ID?No:1所示序列：SFFFLSFHISNLQFNSSLED；

2)SEQ?ID?No:2所示序列：NLQFNSSLEDPSTDYYQELQ；

3)SEQ?ID?No:3所示序列：TAPPVHNVTSASGSASGSAS；

4)SEQ?ID?No:4所示序列：PFSIPSHHSDTPTTLASHST；

5)SEQ?ID?No:5所示序列：TPTTLASHSTKTDASSTHHS；

6）SEQ?ID?No:1-5所示氨基酸序列經氨基酸殘基的取代、缺失或添加而形成的氨基酸衍生序列。

根據本發明的實施例，優選地，本發明的MUC1自身抗體識別的抗原多肽具有如SFFFLSFHISNLQFNSSLED（SEQ?ID?NO:1）所示的氨基酸序列。由此，可以進一步提高利用多肽檢測肺癌或疑似肺癌患者的血液樣品中的MUC1自身抗體的效率。另外，本發明還提出了前面所述的MUC1自身抗體識別的抗原多肽在制備檢測腫瘤血清MUC1抗體試劑盒中的用途。尤其是，該試劑盒可以用于檢測的腫瘤為肺癌。