[發明專利]石刁柏植株的天冬酰氨酶含量差異的檢測方法

無效

• 申請號: 201210500903.7
• 申請日: 2012-11-29
• 公開（公告）號: CN102944526A
• 公開（公告）日: 2013-02-27
• 發明（設計）人: 韓瑩琰;范雙喜;程繼鴻;任月
• 申請（專利權）人: 北京農學院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 北京凱特來知識產權代理有限公司 11260
• 代理人: 鄭立明;趙鎮勇

技術領域

本發明涉及一種石刁柏植株的天冬酰氨酶含量差異的檢測方法。?

背景技術

石刁柏，風味獨特、營養豐富，更有防癌、抗癌的神奇功效，素有“蔬菜王”之美稱。這主要是因為其含有多種調節人體生理功能、預防慢性病發生等保健作用的生物活性物質。石刁柏中所含的天冬酰胺酶，對乳腺癌、肺癌、食管癌、膀胱癌、皮膚癌、胃癌、直腸癌等均有一定的療效。但目前市場上的天冬酰胺酶均為由大腸桿菌（E.coli）和歐文菌（Erwinia）等制備的L-天冬酰胺酶，但對如何確定植物中天冬酰胺酶含量的差異，目前未見有相關檢測方法的報道。?

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種石刁柏植株的天冬酰氨酶含量差異的檢測方法，可以檢測出石刁柏植株不同部位的天冬酰胺酶含量的差異，從而解決目前沒有方法可以檢測出石刁柏的天冬酰氨酶含量差異的問題。?

通過以下技術方案解決上述技術問題：?

本發明實施例提供一種石刁柏中天冬酰氨酶含量差異的檢測方法，包括：?

抽取石刁柏植株，取所述植株的根、莖和葉片作為樣品，分別制成樣品溶液，將所述樣品溶液分別與對照品溶液通過比色法進行比色分析，通過計算光吸收值比較得到石刁柏各部位的天冬酰氨酶含量的差異。?

本發明實施例提供的方法，通過將石刁柏植株的根、莖和葉片制成樣品溶液，利用比色法進行比色分析，可以準確比較出石刁柏植株各部位的天冬酰氨酶含量的差異，從而為利用石刁柏植株提取天冬酰氨酶提供了準確的依據，可以大大提高從石刁柏中提取天冬酰氨酶的效率，緩解天冬酰氨酶市場供不應求的問題。?

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例的技術方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對于本領域的普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他附圖。?

圖1為本發明實施例提供的方法檢測石刁柏根中天冬酰氨酶活性（U/ml）示意圖；?

圖2為本發明實施例提供的方法檢測石刁柏莖中天冬酰氨酶活性（U/ml）示意圖；?

圖3為本發明實施例提供的方法檢測石刁柏葉中天冬酰氨酶活性（U/ml）示意圖。?

具體實施方式

下面對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明的保護范圍。?

本發明實施例提供一種石刁柏植株的天冬酰氨酶含量差異的檢測方法，包括以下步驟：?

抽取石刁柏植株，取所述植株的根、莖（莖可以是取從莖頂端至底端長20cm，基部平均直徑0.5～1.2cm的材料，可以是業內常指的嫩莖）和葉片作為樣品，分別制成樣品溶液，將所述樣品溶液分別與對照品溶液通過比色法進行比色分析，通過計算光吸收值比較得到石刁柏各部位的天冬酰氨酶含量的差異。?

進一步的，上述方法中，抽取石刁柏植株之前，還包括：對石刁柏植株進行雌雄鑒定的步驟，這樣可以檢測出雌雄株的石刁柏植株的各部位的天冬酰氨酶含量的差異。?

進一步的，上述方法中，抽取石刁柏植株之前，還包括對石刁柏植株品種進行鑒定的步驟，這樣可以檢測出不同品種的石刁柏植株的各部位的天冬酰氨酶含量的差異。也可以對石刁柏植株同時進行品種以及雌雄株的鑒定。?

上述方法中，通過以下方式制成樣品溶液：?

將樣品（從石刁柏植株取得的根、莖及葉片）用水洗凈，在105℃的溫度下烘烤15分鐘殺酶，在70℃的溫度下烘干、粉碎、以20目篩過篩得到樣品干粉；?

稱取1.5g所述樣品干粉，濾紙包裹后放置于索氏提取器中，用無水乙醚加熱回流提取1小時，傾去乙醚溶液；待濾紙包揮干乙醚后，置于索氏提取器中，加甲醇加熱回流提取6小時，回收甲醇后，轉移至100ml量瓶，并用甲醇定容到刻度，搖勻；?

吸取樣品溶液1ml，置10ml量瓶中，加質量濃度5%的AlCl₃甲醇溶液1ml，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，靜置10分鐘，即得到樣品溶液。?

上述方法中的對照品溶液通過以下方式制得，包括：?

將所述樣品用水洗凈，在105℃的溫度下烘烤15分鐘殺酶，在70℃的溫度下烘干、粉?碎、以20目篩過篩得到樣品干粉；?