[發(fā)明專利]在單子葉植物中調(diào)控表達(dá)的表達(dá)盒

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210499837.6
• 申請日: 2006-02-08
• 公開（公告）號: CN103131727A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: H-S·宋;M·莫拉;C·達(dá)曼;C·E·羅赫;E·托倫;A·多布森
• 申請（專利權(quán)）人: 巴斯福植物科學(xué)有限公司
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C12N15/113;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;A01H5/00;C12Q1/68;C12N15/10
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 史文靜;黃革生

1.在單子葉植物中調(diào)控表達(dá)的表達(dá)盒，包括

i)至少一個單子葉植物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列，所述的單子葉植物基因為富含羥脯氨酸的糖蛋白(HRGP)基因，

和與之功能性相連的

ii)至少一個核苷酸序列，其與所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列是異源的。

2.權(quán)利要求1的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列可從多肽編碼基因的單子葉植物基因組DNA中獲得，其中所述多肽

編碼單子葉植物富含羥脯氨酸的糖蛋白，與選自SEQ?ID?NO:18和75所述的多肽具有至少90％的氨基酸序列同一性。

3.權(quán)利要求1或2的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列來自玉米或稻植物。

4.權(quán)利要求1至3中任一項的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列來自選自玉米富含羥脯氨酸的糖蛋白(HRGP)基因及其功能等同物的植物基因。

5.權(quán)利要求4的表達(dá)盒，其中功能等同物基因編碼與選自SEQ?ID?NO:18和75所述多肽具有至少90％氨基酸序列同一性的多肽。

6.在單子葉植物中調(diào)控表達(dá)的表達(dá)盒，包括

a)至少一個在單子葉植物中有功能的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列，其包含選自如下序列的至少一個序列：

i)SEQ?ID?NO:11、12、13、14、15、16、71、72和73所述的序列，和

ii)i)中序列的至少50個連續(xù)堿基的片段；和

iii)與SEQ?ID?NO:11、12、13、14、15、16、71、72或73所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列基本上相似、具有至少60％序列同一性的核苷酸序列；和

iv)能與SEQ?ID?NO:11、12、13、14、15、16、71、72或73所述的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列或其互補物在7％十二烷基硫酸鈉(SDS)、0.5M?NaPO₄、1mM?EDTA中于50℃雜交，用2×SSC、0.1%SDS于50℃洗滌的條件下雜交的核苷酸序列；和

v)能與如下核酸雜交的核苷酸序列，其中所述核酸包含SEQ?ID?NO:11、12、13、14、15、16、71、72或73所述的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列或其互補物的50至200個或更多個連續(xù)核苷酸；和

vi)上述i)至v)核苷酸序列中任一的互補物或反向互補物核苷酸序列，

和

b)至少一個核酸序列，其與所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列是異源的。

7.權(quán)利要求1至5中任一項的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列如權(quán)利要求6中所定義。

8.權(quán)利要求6或7的表達(dá)盒，其中權(quán)利要求6的ii)、iii)、iv)、v)和vi)中所定義的序列能夠在單子葉植物細(xì)胞或生物體中修飾轉(zhuǎn)錄。

9.權(quán)利要求6或7的表達(dá)盒，其中權(quán)利要求6的ii)、iii)、iv)、v)和vi)中所定義的序列與SEQ?ID?NO:11、12、13、14、15、16、71、72或73所述的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列基本上具有相同的轉(zhuǎn)錄調(diào)控活性。

10.權(quán)利要求6的表達(dá)盒，其中權(quán)利要求6的iv)或v)中所定義的序列在7%十二烷基硫酸鈉(SDS)、0.5M?NaPO₄、1mM?EDTA中于50℃雜交，用0.1×SSC、0.1%SDS于65℃洗滌的嚴(yán)謹(jǐn)條件下與所指定的靶序列雜交。

11.權(quán)利要求1至10中任一項的表達(dá)盒，其中核酸序列的表達(dá)導(dǎo)致蛋白質(zhì)的表達(dá)，或者反義RNA、正義或雙鏈RNA的表達(dá)。

12.權(quán)利要求1至11中任一項的表達(dá)盒，其中表達(dá)盒還包括至少一種選自如下的元件：

a)植物表達(dá)基因的5’非翻譯區(qū)，和

b)植物表達(dá)基因的內(nèi)含子序列，和

c)植物表達(dá)基因的轉(zhuǎn)錄終止序列。

13.權(quán)利要求12的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄終止序列選自SEQ?ID?NO:32、34和35所述的序列。

14.權(quán)利要求12的表達(dá)盒，其中5’非翻譯區(qū)與轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列來自相同的基因。

15.權(quán)利要求12的表達(dá)盒，其中內(nèi)含子序列具有增強表達(dá)的特性。

16.權(quán)利要求12或15的表達(dá)盒，其中內(nèi)含子序列是遍在蛋白、肌動蛋白或醇脫氫酶基因的內(nèi)含子。