[發(fā)明專利]在單子葉植物中調(diào)控表達(dá)的表達(dá)盒

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210499813.0
• 申請(qǐng)日: 2006-02-08
• 公開（公告）號(hào): CN103131697A
• 公開（公告）日: 2013-06-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: H-S·宋;M·莫拉;C·達(dá)曼;C·E·羅赫;E·托倫;A·多布森
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 巴斯福植物科學(xué)有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/11
• 分類號(hào): C12N15/11;C12N15/113;C12N15/63;C12N5/10;C12N15/82;C12Q1/68;A01K67/00;A01H5/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 史文靜;黃革生

1.在單子葉植物中調(diào)控表達(dá)的表達(dá)盒，包括

i)至少一個(gè)單子葉植物基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列，所述的單子葉植物基因?yàn)槿樗崦摎涿富颍?/p>

和與之功能性相連的

ii)至少一個(gè)核苷酸序列，其與所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列是異源的。

2.權(quán)利要求1的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列可從多肽編碼基因的單子葉植物基因組DNA中獲得，其中所述多肽

a1)包含單子葉植物乳酸脫氫酶蛋白的至少一個(gè)序列基序，所述序列基序選自如下氨基酸序列：

i)SLSELGFDA??????(SEQ?ID?NO:76),

ii)VIGAGNVGMA????(SEQ?ID?NO:77),

iii)IVTAGARQI????(SEQ?ID?NO:78),

iv)L(F/Y)RKIVP???(SEQ?ID?NO:79),

v)GFPASRV????????(SEQ?ID?NO:80),

vi)RF(L/I)AEHL???(SEQ?ID?NO:81),

vii)QAYMVGEH?????(SEQ?ID?NO:82),

viii)ALEGIRRAV???(SEQ?ID?NO:83),和

ix)GYSVAS(L/I)A??(SEQ?ID?NO:84),

或者

b1)編碼單子葉植物乳酸脫氫酶蛋白，與選自SEQ?ID?NO:26、60和65所述的多肽具有至少90％的氨基酸序列同一性。

3.權(quán)利要求1或2的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列來(lái)自玉米或稻植物。

4.權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列來(lái)自選自玉米乳酸脫氫酶基因及其功能等同物的植物基因。

5.權(quán)利要求4的表達(dá)盒，其中功能等同物基因編碼與選自SEQ?ID?NO:26、60和65所述多肽具有至少90％氨基酸序列同一性的多肽。

6.在單子葉植物中調(diào)控表達(dá)的表達(dá)盒，包括

a)至少一個(gè)在單子葉植物中有功能的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列，其包含選自如下序列的至少一個(gè)序列：

i)SEQ?ID?NO:19、20、21、22、23、24、56、57、58、61、62、和63所述的序列，和

ii)i)中序列的至少50個(gè)連續(xù)堿基的片段；和

iii)與SEQ?ID?NO:19、20、21、22、23、24、56、57、58、61、62、或63所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列基本上相似、具有至少60％序列同一性的核苷酸序列；和

iv)能與SEQ?ID?NO:19、20、21、22、23、24、56、57、58、61、62、或63所述的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列或其互補(bǔ)物在7％十二烷基硫酸鈉(SDS)、0.5M?NaPO₄、1mM?EDTA中于50℃雜交，用2×SSC、0.1%SDS于50℃洗滌的條件下雜交的核苷酸序列；和

v)能與如下核酸雜交的核苷酸序列，其中所述核酸包含SEQ?ID?NO:19、20、21、22、23、24、56、57、58、61、62、或63所述的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列或其互補(bǔ)物的50至200個(gè)或更多個(gè)連續(xù)核苷酸；和

vi)上述i)至v)核苷酸序列中任一的互補(bǔ)物或反向互補(bǔ)物核苷酸序列，

和

b)至少一個(gè)核酸序列，其與所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列是異源的。

7.權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的表達(dá)盒，其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列如權(quán)利要求6中所定義。

8.權(quán)利要求6或7的表達(dá)盒，其中權(quán)利要求6的ii)、iii)、iv)、v)和vi)中所定義的序列能夠在單子葉植物細(xì)胞或生物體中修飾轉(zhuǎn)錄。

9.權(quán)利要求6或7的表達(dá)盒，其中權(quán)利要求6的ii)、iii)、iv)、v)和vi)中所定義的序列與SEQ?ID?NO:19、20、21、22、23、24、56、57、58、61、62、或63所述的轉(zhuǎn)錄調(diào)控核苷酸序列基本上具有相同的轉(zhuǎn)錄調(diào)控活性。

10.權(quán)利要求6的表達(dá)盒，其中權(quán)利要求6的iv)或v)中所定義的序列在7%十二烷基硫酸鈉(SDS)、0.5M?NaPO₄、1mM?EDTA中于50℃雜交，用0.1×SSC、0.1%SDS于65℃洗滌的嚴(yán)謹(jǐn)條件下與所指定的靶序列雜交。