[發明專利]一株人參病害生物防治菌株的獲得及應用

無效

• 申請號: 201210498378.X
• 申請日: 2012-11-29
• 公開（公告）號: CN103013860A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 陳長卿;姜云;尹望
• 申請（專利權）人: 吉林農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01N63/02;A01P3/00;A01P1/00;C12R1/07
• 代理公司: 長春市東師專利事務所 22202
• 代理人: 張鐵生

技術領域

本發明屬于植物生物防治技術領域，具體涉及防治植物，特別是一株人參病害生物防治菌株的甲基營養型芽孢桿菌（Bacillusmethylotrophicus）及應用。?

背景技術

人參是一種名貴的中藥材，在我國具有悠久的藥用歷史，近些年由于市場需求的增長，人工栽培人參規模也隨之增加。在人參種植過程中，病害的發生和發展將會對產量和品質造成嚴重的影響，有效控制病害是人參生產中的重要環節。目前，防治病害的主要方法是利用化學農藥在病害發生期進行控制，但長期使用化學農藥或不合理使用會導致人參中農藥殘留超標、品質下降、污染環境和病原菌產生抗藥性等不良后果的出現。自2007年以來，我國人參產品出口數量呈下降趨勢，出口的人參常因農藥殘留超標不時有被退回的現象發生，國際市場信譽不良。因此開展人參病害生物防治研究，獲得生防菌株和有效產品，減少或替代化學農藥的使用，對于保障我國人參生產安全，加快人參產業可持續發展進程，提高我省人參產品的質量及國際市場競爭力具有重要意義。?

植物內生菌是一類定殖在植物體內與植物建立和諧關系的一類微生物，有些菌株具有拮抗、促生等生物學功能，可產生多種生物活性物質，特別是在新的抗植物病蟲害物質方面，為我們提供了一類新的微生物資源，目前已有多種植物的功能內生菌報道。因此，從人參植株體內獲得具有較好抗菌和生防作用的新型細菌菌株，進而生產出高效的生物菌劑，將有利于人參病害的防治，減少化學農藥的污染。?

發明內容

本發明的目的是植物，特別是人參病害防治生物農藥，克服農藥殘留超標問題，而提供一種人參內生拮抗細菌，甲基營養型芽孢桿菌菌株。?

甲基營養型芽孢桿菌（Bacillusmethylotrophicus）NJ13?，它的保藏編號為CGMCC?No.6679；?

甲基營養型芽孢桿菌NJ13的種子培養基，它包括：胰蛋白胨10g/L、酵母膏10g/L、NaCl?5g/L，?pH為7.0；

甲基營養型芽孢桿菌NJ13的發酵培養基，它包括：葡萄糖30?g/L、淀粉15?g/L、酵母浸粉15?g/L、NaCl?5?g/L、K₂HPO_4?1?g/L?，pH?8.0；

甲基營養型芽孢桿菌NJ13在防治植物病害方面的應用，所述的植物病害是由人參銹腐病菌、人參灰霉病菌、人參菌核病菌、人參疫病病菌、人參黑斑病菌、人參根腐病菌、人參立枯病菌、大豆根腐病鐮刀菌、玉米莖基腐病鐮刀菌、玉米大斑病菌、水稻紋枯病菌、煙草赤星病菌、煙草炭疽病菌、番茄葉霉病菌、甜瓜細菌性果斑病菌、煙草野火病菌、番茄細菌性斑點病菌、白菜軟腐病菌、黃瓜細菌性斑點病菌和/或水稻白葉枯病菌引起的；

植物病害防治的生物農藥，它是甲基營養型芽孢桿菌NJ13的發酵菌液

植物病害防治的生物農藥，它是發酵菌液濾出菌體后的濾液。

植物病害防治的生物農藥是由下述方法制得，它包括：?

1）種子培養液制備，甲基營養型芽孢桿菌NJ13在種子培基中，即胰蛋白胨10?g/L、酵母膏10?g/L、NaCl?5g/L、pH?7.0，培養10h；

2）種子培養液接種于發酵培養基中，即葡萄糖30?g/L、淀粉15?g/L、酵母浸粉15?g/L、NaCl?5?g/L、K₂HPO_4?1?g/L，pH?8.0，?28℃恒溫搖床培養96?h，制得的發酵液；

將所述的發酵液稀釋5倍。

本發明提供了人參內生拮抗細菌NJ13，是一種甲基營養型芽孢桿菌，是從人參莖部分離、篩選得到的；其發酵菌液及其濾液能拮抗人參常見7種病害及其它常見植物病害，特別是對人參灰霉病和人參黑斑病防治效果更佳；它來源于人參植株，對人參安全；發酵過程中所用原料成本較低；抗菌活性物質制備簡單，操作方便，防治效果好；能有效的解決人參農藥防治殘留嚴重的問題，是一種可產業化生產的、廣譜、高效的綠色生物農藥。?

附圖說明

圖1?為NJ13菌株菌體對3種人參病原菌的抑制作用圖，A：人參菌核病菌；B：人參立枯病菌；C：人參黑斑病菌；?

圖2?為NJ13菌株的抗菌譜的測定，A：人參灰霉病菌；B：人參立枯病菌；C：人參銹腐病菌；D：人參根腐病菌；

圖3?為NJ13菌株菌落形態和染色觀察，A：菌落形態；B：革蘭氏染色形態；

圖4?為NJ13菌株的細胞形態；