[發明專利]用于MST1基因定量檢測的標準質粒及試劑盒

無效

• 申請號: 201210494882.2
• 申請日: 2012-11-28
• 公開（公告）號: CN103014032A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 楊利峰;趙德明;潘博;尹曉敏;王進;王繼宏;王運盛;周向梅;趙化粉
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N15/63;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

1.用于檢測MST1基因的靶序列，其特征在于，其含有如SEQID?NO.1所示的核苷酸序列。

2.含有權利要求1所述靶序列的重組質粒。

3.權利要求2所述的重組質粒作為標準陽性參考物質用于哺乳動物MST1基因的分子生物學檢測的用途。

4.如權利要求3所述的用途，其特征在于，所述分子生物學檢測為PCR或熒光定量PCR檢測。

5.可特異性擴增MST1基因的引物，其特征在于，具有如SEQID?NO.2和SEQ?ID?NO.3所示的核苷酸序列，所述的MST1基因含有如SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列。

6.一種檢測MST1基因的方法，其特征在于，從動物組織或細胞中提取總RNA，反轉錄獲得cDNA，利用權利要求5所述的引物進行實時熒光定量PCR，同時設立無模板對照和陽性對照，根據擴增曲線判定結果。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，其20μL總工作體系為：

8.如權利要求6所述的方法，其特征在于，其反應程序為：50℃UNG酶孵育2min，95℃變性30sec；95℃變性5sec，55℃退火20sec，72℃延伸30sec，84℃數據采集1s，40個循環；72℃延伸10min。

9.一種檢測MST1基因的試劑盒，其特征在于，含有權利要求5所述的引物。

10.如權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，還包括：熒光定量反應液、陰性模板、陽性模板，所述陰性模板為雙蒸水，所述陽性模板為權利要求2所述的重組質粒。