[發明專利]EXENDIN-4類似物二聚體及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210493386.5
• 申請日: 2012-11-27
• 公開（公告）號: CN103833841B
• 公開（公告）日: 2016-11-30
• 發明（設計）人: 王玉麗;鄭學敏;黃長江;龔珉;徐為人;湯立達
• 申請（專利權）人: 天津藥物研究院
• 主分類號: C07K14/575
• 分類號: C07K14/575;C07K19/00;C07K1/06;C07K1/04;A61K38/22;A61P3/04;A61P3/10
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 劉丹妮

1.一種EXENDIN-4類似物單體，所述單體為只含有一個半胱氨酸的EXENDIN-4類似物單體，其序列為下述SEQ?ID?NO:1所示的氨基酸序列：

HGEX₁T?FTSDX₂SKQX₃E?EEAVR?X₄FIEW?LKX₅GG?PSSX₆A?PPPS

其中，X₁為半胱氨酸或甘氨酸；

X₂為半胱氨酸或亮氨酸；

X₃為半胱氨酸或甲硫氨酸；

X₄為半胱氨酸或亮氨酸；

X₅為半胱氨酸或天冬酰胺；

X₆為半胱氨酸或甘氨酸。

2.根據權利要求1所述的EXENDIN-4類似物單體，其特征在于，所述EXENDIN-4類似物單體選自SEQ?ID?NO:2、SEQ?ID?NO:3、SEQ?IDNO:4、SEQ?ID?NO:5、SEQ?ID?NO:6和SEQ?ID?NO:7所示的氨基酸序列的EXENDIN-4單體。

3.一種EXENDIN-4類似物二聚體，所述二聚體由兩個相同或不同的權利要求1或2所述的單體通過半胱氨酸形成單體間二硫鍵制得。

4.一種制備根據權利要求1或2所述的單體和/或根據權利要求3所述的EXENDIN-4類似物二聚體的制備方法，所述方法包括：采用Fmoc固相多肽合成法合成EXENDIN-4類似物單體；

優選地，當制備EXENDIN-4類似物二聚體時，還包括將制得的EXENDIN-4類似物單體通過碳酸氫銨或其他還原劑來形成單體間二硫鍵的步驟；

還優選地，所述固相合成是以固相載體樹脂為載體，從C端即羧基端向N端即氨基端逐漸添加氨基酸的過程，所述樹脂優選為Fmoc-wang樹脂或2-cl-trt樹脂，更優選地，所述固相合成中使用的脫保護試劑為：哌啶/N,N-二甲基甲酰胺，其比例為10:90~30:70；或更優選地，所述固相合成中使用的偶聯試劑為苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽/1-羥基苯并三唑(HOBT)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/1-羥基苯并三唑(HOBT)或N,N'-二異丙基碳二亞胺；

最優選地，當使用苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸鹽/1-羥基苯并三唑(HOBT)或2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯/1-羥基苯并三唑(HOBT)時，所述反應中過程中還添加縛酸劑：DIEA/NMP；

進一步優選地，所述反應中所使用的切割試劑為：TFA/茴香硫醚/水/苯酚/1,2-乙二硫醇，其比例為：82.5:5:5:5:2.5。

5.一種用于治療糖尿病、治療和/或預防肥胖癥或肥胖癥相關疾病的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物含有根據權利要求3所述的EXENDIN-4類似物二聚體和藥學上可接受的輔料。

6.根據權利要求5所述的藥物組合物，其特征在于，所述輔料選自水溶性填充劑、PH調節劑、穩定劑、注射用水和滲透壓調節劑。

7.根據權利要求5或6所述的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物為注射劑。

8.根據權利要求7所述的藥物組合物，其特征在于，所述注射劑為凍干粉針或溶液注射劑。

9.根據權利要求1或2所述的單體或根據權利要求3所述的EXENDIN-4類似物二聚體在制備用于治療糖尿病、治療和/或預防肥胖癥或肥胖癥相關疾病的藥物中的應用。

10.根據權利要求5至8中任一項所述的藥物組合物在制備用于治療糖尿病、治療和/或預防肥胖癥或肥胖癥相關疾病的藥物中的應用。