[發明專利]一種模擬骨髓間充質干細胞移植體外模型的構建方法有效
| 申請號: | 201210492449.5 | 申請日: | 2012-11-27 |
| 公開(公告)號: | CN102994450A | 公開(公告)日: | 2013-03-27 |
| 發明(設計)人: | 姜曉丹;李鵬;法志強;張潤;孫海濤;劉翼 | 申請(專利權)人: | 姜曉丹;李鵬 |
| 主分類號: | C12N5/0793 | 分類號: | C12N5/0793;C12N5/0775 |
| 代理公司: | 廣州知友專利商標代理有限公司 44104 | 代理人: | 宣國華 |
| 地址: | 510282 廣東省廣州市海珠區工業*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 模擬 骨髓 間充質 干細胞 移植 體外 模型 構建 方法 | ||
1.一種模擬骨髓間充質干細胞移植體外模型的構建方法,其特征是含以下步驟:
(1)選取離體乳鼠皮層神經元,經培養鑒定后待用;
(2)選取離體大鼠骨髓間充質干細胞,經培養鑒定后待用;
(3)將大鼠骨髓間充質干細胞經預處理后,接種于步驟(1)的乳鼠皮層神經元中進行共培養,接種密度為1.0-5.0×104個/cm2,共培養時間為4~6天;
(4)將共培養后的大鼠骨髓間充質干細胞和乳鼠皮層神經元經光鏡、熒光顯微鏡、原子力顯微鏡及掃描電鏡檢測,確立模擬骨髓間充質干細胞移植的體外模型建立,并在超微結構上鑒定確定皮層神經元與骨髓間充質干細胞之間突觸樣結構的形成。
2.根據權利要求1所述的模擬骨髓間充質干細胞移植體外模型的構建方法,其特征是:步驟(1)中離體乳鼠皮層神經元通過免疫熒光法鑒定。
3.根據權利要求1所述的模擬骨髓間充質干細胞移植體外模型的構建方法,其特征是:步驟(2)中大鼠骨髓間充質干細胞采用流式法鑒定。
4.根據權利要求1所述的模擬骨髓間充質干細胞移植體外模型的構建方法,其特征是:步驟(3)中大鼠骨髓間充質干細胞預處理為:取大鼠骨髓間充質干細胞,經胰酶消化,離心后,再經DMEM/F12培養基、2%B-27和2%胎牛血清重懸處理大鼠骨髓間充質干細胞即可。
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