[發(fā)明專利]一株暗雙孢AGR0073菌株及其抗香蕉小竇氏葉斑病微生物制劑與應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210486198.X
• 申請(qǐng)日: 2012-11-26
• 公開（公告）號(hào): CN102994397A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊佩文;曾莉;番華彩;郭志祥;李元廣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境資源研究所
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;A01N63/04;A01P3/00;C12R1/645
• 代理公司: 昆明合眾智信知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 53113
• 代理人: 康珉

1.暗雙孢（Cordana?musae）AGR0073?CGMCC?No.?6644菌株。

2.一種抗香蕉小竇氏葉斑病微生物制劑的制備方法，其特征在于步驟如下：

（1）試管種培養(yǎng)

將暗雙孢（Cordana?musae）AGR0073?CGMCC?No.?6644菌株接種到試管固體培養(yǎng)基斜面上，于28℃下培養(yǎng)120h，獲得試管種；所述的固體培養(yǎng)基的配方為：馬鈴薯?200g，蔗糖20g，瓊脂15g，蒸餾水1000ml，pH?7.0；

（2）液體種子培養(yǎng)

采用三角瓶搖瓶培養(yǎng)，方法是：

①配制液體種子培養(yǎng)基，按液體種子培養(yǎng)基配方所述的各成分及其含量混合而成液體種子培養(yǎng)基，所述的液體種子培養(yǎng)基的配方是：馬鈴薯?200g，蔗糖20.0g，酵母浸膏5.0g，蒸餾水1000ml，pH?7.0；

②在三角瓶中裝入100ml所述的液體種子培養(yǎng)基，121℃滅菌20min，冷卻后接入1cm²的試管種，28℃下于轉(zhuǎn)速為220?r·min^-1的搖床上培養(yǎng)72h得液體種子；

（3）制備所述的抗香蕉小竇氏葉斑病微生物制劑

采用三角瓶搖瓶培養(yǎng)，方法是：

①配制液體發(fā)酵培養(yǎng)基，按液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方所述的各成分及其含量混合而成液體發(fā)酵培養(yǎng)基，液體發(fā)酵培養(yǎng)基配方是：馬鈴薯?200g，蔗糖20.0g，酵母浸膏5.0g，蒸餾水1000ml，pH?7.0；

②在三角瓶中裝入200ml液體發(fā)酵培養(yǎng)基，121℃滅菌20min，冷卻后接入10ml步驟（2）培養(yǎng)得到的液體種子，28℃下于轉(zhuǎn)速為220?r·min^-1的搖床上培養(yǎng)120h得發(fā)酵液；

③在發(fā)酵液中加入等體積的以質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì)的100%丙酮，經(jīng)搖床振蕩12?h后，用轉(zhuǎn)速為4000r·min^-1的離心機(jī)離心15min，取上清液并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上25℃蒸發(fā)去除丙酮，用水稀釋到原發(fā)酵液體積，即得到所述的抗香蕉小竇氏葉斑病微生物制劑。

3.一種抗香蕉小竇氏葉斑病微生物制劑，其活性成分為權(quán)利要求1所述的暗雙孢（Cordana?musae）AGR0073?CGMCC?No.?6644菌株。

4.一種抗香蕉小竇氏葉斑病微生物制劑，按權(quán)利要求2所述的抗香蕉小竇氏葉斑病微生物制劑的制備方法制備得到。

5.權(quán)利要求1所述的暗雙孢（Cordana?musae）AGR0073?CGMCC?No.?6644菌株在抗香蕉小竇氏葉斑病中的應(yīng)用。

6.權(quán)利要求3或4所述的抗香蕉小竇氏葉斑病微生物制劑在抗香蕉小竇氏葉斑病中的應(yīng)用。