[發明專利]過山蕨總黃酮在制備預防和治療腫瘤藥物方面的應用

有效

• 申請號: 201210486111.9
• 申請日: 2012-11-26
• 公開（公告）號: CN102935096A
• 公開（公告）日: 2013-02-20
• 發明（設計）人: 杜鋼軍;盧琳琳;楊義明;林海紅;張亞平;孫婷;劉偉杰;李佳桓;劉迎輝;趙貝;李鴻儒;侯西棟
• 申請（專利權）人: 河南大學
• 主分類號: A61K36/11
• 分類號: A61K36/11;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 田小伍;楊海霞

技術領域

本發明屬于過山蕨總黃酮應用技術領域，具體涉及過山蕨總黃酮作為賴氨酸氧化酶抑制劑，在制備預防和治療腫瘤藥物方面的應用，如預防化學致癌（如肺癌、乳腺癌和紫外線引起的皮膚癌等），阻止腫瘤細胞生長和轉移，增強腫瘤化療效果等。

背景技術

腫瘤是一種嚴重危害人體健康的重大疾病，雖然傳統的治療方法如手術、化療和放療對早期腫瘤控制有了很大提高，但由于腫瘤早期癥狀的隱蔽性，多數惡性腫瘤一發現即處于中晚期，加上目前腫瘤發生的病因不完全清楚，進一步探索腫瘤發生的原因和發現新的治療藥物仍是腫瘤研究的重要任務。低氧是實體腫瘤的一個典型特征，利用這個現象創造的2-(¹⁸F)-D-脫氧葡萄糖-正電子發射斷層掃描技術（FDG-PET）已廣泛用于腫瘤影像學診斷，其在鑒別腫塊良、惡性及評價其惡性程度、判斷淋巴結轉移及遠處轉移、輔助臨床分期和評估治療療效及預后等方面均發揮著重大作用。低氧微環境有利于腫瘤細胞抵抗凋亡和基因異質性，對腫瘤的發生、發展和轉移均有促進作用，也降低腫瘤細胞對放化療的敏感性，是制約腫瘤患者治療效果的主要障礙之一，靶向低氧微環境已經成為發展腫瘤治療新方法的重要措施。

賴氨酸氧化酶是一種以銅離子為輔酶、催化細胞外環境中膠原和彈性蛋白共價交聯的氨基氧化酶，決定著細胞外基質和結締組織的機械性能，也是腫瘤低氧微環境主要的調控因子-低氧誘導因子的執行者，在多種腫瘤中都有明顯上調，對腫瘤發展和轉移有促進作用，是目前腫瘤治療潛在的重要靶點之一。過山蕨,?又名馬蹬草、還陽草、過橋草,?為鐵角蕨科植物過山蕨（Camptosorus?sibiricus?Rupr.）?的地上全草，主產于東北、華北、西北、內蒙古等地，歷代本草未見有關其藥用記載，民間用于治療外傷出血、子宮出血、血栓閉塞性脈管炎、神經性皮炎、腦栓塞引起的偏癱以及糖尿病并發癥等。現代藥理研究表明過山蕨水醇提取液對兔耳血管、蟾蜍后肢血管以及家兔肢體后肢血管有擴張作用,?其有效部位為黃酮和有機酸。本申請首次發現過山蕨總黃酮是一個賴氨酸氧化酶抑制劑，具有很好的預防和治療腫瘤作用，進而對其在腫瘤中潛在的臨床應用進行了深入的研究。

發明內容

本發明目的在于提供過山蕨總黃酮作為賴氨酸氧化酶抑制劑，在制備預防和治療腫瘤藥物方面的應用。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

過山蕨總黃酮作為賴氨酸氧化酶抑制劑，在制備預防和治療腫瘤藥物方面的應用

進一步的，過山蕨總黃酮在制備抗癌藥物方面的應用，尤其是過山蕨總黃酮在制備抗皮膚癌、肺癌和乳腺癌藥物方面的應用。

過山蕨總黃酮作為一個賴氨酸氧化酶抑制劑，可以在腫瘤預防和治療方面有廣泛作用，包括腫瘤預防、治療、輔助化療及術后應用。其動物有效劑量范圍為口服10-1000mg/kg體重/日、注射5-500mg?/?kg體重/日，優選劑量為口服50-500mg?/kg體重/日、注射20-200mg?/kg體重/日。推算的人用有效劑量范圍為口服80-8000mg?/日、注射50-5000mg?/日，優選劑量為口服0.5-5g/日、注射0.2-2g/日。

所述過山蕨總黃酮可按照本領域常規技術進行提取即可。如，在本發明中，過山蕨總黃酮可按下述方法獲取：將洗凈、烘干、粉碎過的過山蕨地上全草經石油醚脫脂后，用體積濃度50－60%的乙醇水溶液按液料比25－35∶1于85±5℃提取2次，每次2h，過濾，合并提取液并濃縮至每ml相當于0.1g原藥材，分別用95%乙醇（指體積濃度，下同）、70%乙醇各醇沉1次，過濾，濾液再經大孔吸附樹脂吸附、60%乙醇洗脫，洗脫液真空干燥后即得。以蘆丁為標準經分光光度測定總黃酮含量>90%。

本發明經試驗發現：過山蕨總黃酮能抑制誘癌組織和腫瘤組織賴氨酸氧化酶，其作為賴氨酸氧化酶抑制劑可用于預防和治療多種腫瘤，并有化療增效作用。過山蕨總黃酮對UVB引起的小鼠皮膚癌、二甲基苯蒽/巴豆油引起的小鼠皮膚癌及烏拉坦引起的小鼠肺癌均有顯著降低發病率作用（見圖1、圖2）；對小鼠lewis肺癌皮下腫瘤及小鼠4T1乳腺癌原位腫瘤均有明顯抑制生長和阻止自發轉移及人工被動轉移作用（見圖3、圖4、圖5），能抑制誘癌組織和腫瘤組織賴氨酸氧化酶（見圖6）。過山蕨總黃酮對小鼠lewis肺癌和小鼠4T1乳腺癌人工被動轉移均有顯著抑制作用（見圖7）。過山蕨總黃酮對阿霉素、環磷腺癌、氟尿嘧啶治療的小鼠lewis肺癌皮下腫瘤均有增效作用（見圖8、圖9）、可以阻止小鼠4T1乳腺癌術后復發（見圖10、圖11）。