[發明專利]一種水中痕量非甾體抗炎藥的檢測方法

無效

• 申請號: 201210484173.6
• 申請日: 2012-11-26
• 公開（公告）號: CN102998388A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 段艷平;陳玲;溫智皓;孟祥周;張吉營;趙夢
• 申請（專利權）人: 同濟大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 張磊

技術領域

本發明屬于環境保護和水處理技術領域，涉及一種測定實際環境水體中痕量非甾體抗炎藥的方法。

背景技術

水環境中藥物殘留問題已引起國內外廣泛關注，成為當前環境領域的研究熱點。藥物的大量使用及濫用，使得該類物質及其活性組分被持續不斷地輸入到水體環境中，藥物的特性（旋光性、半揮發性、極性及高毒性等點）和水體環境自身存在的演變規律決定了這些物質將在水體環境中進行持續不斷地長距離遷移擴散，并形成普遍性累積，其歸趨的不確定性給人類健康形成了不可預測的潛在風險。

近年來，我國關于水體中藥物的污染研究主要集中在抗生素方面，而對另一大類的非處方藥（如非甾體抗炎藥（NSAIDs））的相關研究較少涉及。NSAIDs類藥物主要包括阿司匹林、布洛芬、萘普生、雙氯酚酸、酮洛芬、苯扎貝特等，該類藥物具有抗炎、抗風濕、止痛、退熱和抗凝血等作用，在臨床上廣泛用于骨關節炎、多種發熱和各種疼痛癥狀的緩解。目前，我國非甾體抗炎藥在風濕及類風濕性關節炎用藥中一直占據主導地位，其用量遠遠高于其它類藥物。未被完全吸收、利用的這些藥物及其代謝物將通過尿液、糞便排泄等途徑進入城市污水處理廠。而研究表明，污水處理廠現有處理技術不能有效去除該類藥物，導致這些親水性藥物，源源不斷輸入環境水體中并形成普遍性累積，能夠長期作用于水生態系統，對水環境產生潛在威脅，同時造成水體污染，進而直接或間接影響飲用水質量，危害人體健康。為此，建立環境水體中非甾體抗炎藥的分析方法，對污水處理系統中該類藥物的控制和生態風險評價，具有重要意義。

目前，國內在非甾體抗炎藥生產過程中的質控分析、食品中殘留分析方面常有報道；但因環境水體中非甾體抗炎藥濃度低、分析難度高，研究報道甚少。因此，研究建立一種適用于分析復雜水樣中痕量非甾體抗炎藥的檢測方法十分迫切。

發明內容

針對目前水樣中非甾體抗炎藥分析方法缺乏的現狀，本發明的目的在于提供一種適合不同水樣（污水、地表水或飲用水）中痕量非甾體抗炎藥的快速、靈敏、準確的分析檢測方法，以實現復雜水樣中痕量非甾體抗炎藥的萃取、凈化和測定。

本發明的技術方案如下：

（1）水樣預處理

將水樣通過0.7?μm的玻璃纖維濾膜過濾后，用2?mol/L鹽酸或氫氧化鈉溶液調節pH值至4左右，得到預處理后的水樣。

（2）固相萃取

①?將固相萃取柱(C18)?依次用5?mL甲醇和3?mL去離子水（pH<4）活化后，得到活化后的固相萃取柱；

②?將一定體積的預處理水樣（污水：200?mL;?地表水或飲用水：500?mL）以5~10?mL/min的速度通過活化后的固相萃取柱后，用3~5?mL?含5%甲醇的水溶液淋洗固相萃取柱，凈化去除雜質，廢棄淋洗液；

③將凈化后的固相萃取柱真空抽干15~20min后，用3×1mL的甲醇溶液洗脫，控制流速為0.5~1?mL/min，收集洗脫液；

④將收集的洗脫液在室溫氮氣流下吹至近干，然后用含有0.1%乙酸的甲醇溶液定容至0.5?mL，用0.22?μm的有機相針孔濾膜過濾后，得到待測樣品。

（3）高效液相色譜串聯質譜檢測

采用高效液相色譜-串聯質譜檢測系統對樣品進行測定。

①?色譜條件：

色譜柱：Agilent?Eclipse?XDB?C₁₈反相柱（(150?mm?×?2.1?mm,?5μm)；流動相A：甲醇，B:?含0.1%乙酸的去離子水溶液;?梯度洗脫程序為：75?%?A保持5?min，?然后在5min內將A線性增加至90?%并保持5?min，隨后在5?min內降低A至75?%，保持5?min。流速：300?μL/min;?進樣體積：10μL;?柱溫：30℃。

②?質譜條件：

離子源：電噴霧負離子化（ESI）源；檢測模式：負離子模式檢測；離子噴射電壓：-4500V；溫度：450℃；掃描方式：多重反應監測（MRM）；毛細管電壓?：3000V。氣簾氣體N₂壓力：20psi；碰撞氣體N₂壓力：Medium。

所述的步驟（3）中儀器測定值為本測定方法通過濃縮得到的水樣中非甾體抗炎藥的濃度，水樣中非甾體抗炎藥的實際濃度為儀器測定值除以富集倍數(見公式1所示)。采用外標法進行定量。

???????????????????????????????????（1）

其中，C_si為水樣中某非甾體抗炎藥的實際濃度；