[發明專利]一種FK506-A化合物的制備方法

有效

• 申請號: 201210483603.2
• 申請日: 2012-11-23
• 公開（公告）號: CN102924478A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 任風芝;段寶玲;張雪霞;陳書紅;李麗紅;劉進懷;鄭智慧;成曉迅;張艷立;李曉露;李寧;王海燕;孟雅娟
• 申請（專利權）人: 華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司
• 主分類號: C07D498/18
• 分類號: C07D498/18
• 代理公司: 石家莊國域專利商標事務所有限公司 13112
• 代理人: 白海靜

技術領域

本發明屬于生物化學技術領域，具體地說涉及一種大環內酯類化合物FK506-A化合物的制備方法。

技術背景

FK506（Tacrolimus）是筑波鏈霉菌（Streptomyces?tsukubaensis）產生的大環內酯類化合物，其目前被用于制備免疫抑制類藥物。該化合物的分子式為C₄₄H₆₉NO₁₂，分子量為804.02，其分子內具有23元的環狀結構，其結構式如下：

據文獻報道，FK506性質不穩定，可發生異構化反應，產生同分異構體（Tetrahedron?Letters，Vol31，No.45，pp6477-6480，1990）。將結構如式（1）所示的異構體命名為FK506-A化合物。

式（1）

目前的研究中，FK506-A被認為是FK506不穩定產物，因此鮮有人對其進行深入的探討和研究。

發明內容

本發明的目的是提供一種FK506-A化合物的制備方法，該方法操作簡便、產品純度高，適于工業化生產應用。

為實現本發明目的，本發明提供了FK506-A化合物的制備方法，該化合物結構如式（1）所示

該方法包括以下步驟：

a、將FK506于110-150℃下加熱2-25分鐘，得到FK506-A粗品；

b、向FK506-A粗品中加入有機溶劑，溶解后加入硅膠，攪拌均勻后干燥，得到干樣；

c、將干樣加入裝有硅膠的層析柱中，加入洗脫溶劑進行洗脫，收集經HPLC測定純度≥75%的洗脫液，濃縮至干，所得固體進行結晶得到FK506-A純品。

本發明a步驟所述加熱，其溫度最好為120-130℃。在該溫度下，FK506反應更完全，且副產物較少。

本發明b步驟所述有機溶劑為氯仿、乙酸乙酯、乙醚、乙腈、乙酸丁酯、丙酮、乙醇、甲醇中任意一種。優選氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇中任意一種。

本發明所述硅膠，其粒度最好為100-400目。該粒度下的硅膠吸附作用優良，且較易洗脫。

本發明b步驟所述硅膠，其用量最好為FK506-A粗品質量的1-2.5倍。

本發明c步驟所述硅膠，其用量為FK506-A粗品質量的8-15倍，優選10倍。

本發明c步驟所述洗脫溶劑為石油醚、正己烷、乙酸乙酯、乙醚、異丙醚、乙腈、乙酸丁酯、丙酮、乙醇、甲醇中任意一種或幾種的混合液，優選石油醚、正己烷、乙酸乙酯、乙醚、異丙醚、乙腈、丙酮中任意一種或兩種的混合液。

本發明c步驟所述濃縮，最好是在30-60℃下減壓濃縮。

本發明c步驟所述結晶，其方法是向每克固體中加入5-15毫升結晶溶劑，溶解后，緩慢降溫結晶，待晶體不再析出后，過濾，用結晶溶劑洗滌濾餅1-2次后將濾餅置于30-60℃下真空干燥，所述結晶溶劑是正己烷、乙酸乙酯、乙醚、異丙醚、乙腈、乙酸丁酯、丙酮、乙醇、異丙醇、甲醇、水中任意一種或幾種的混合液，優選正己烷、乙酸乙酯、乙醚、乙腈、丙酮、異丙醇、水中任意一種或兩種的混合液。

上述“每克固體中加入5-15毫升結晶溶劑，溶解”，是以能夠使固體完全溶解為原則。本領域技術人員可根據所選擇結晶溶劑的性質，使用加熱或超聲等輔助溶解手段來促進其溶解。

本發明所述FK506-A是一種大環內酯類化合物，藥理實驗研究表明，它具有免疫抑制作用，可用于制備免疫抑制類藥物。本發明所述FK506-A的制備方法，利用了FK506的異構化反應，通過控制反應溫度和時間，提高了反應效率，結合后續的硅膠柱層析分離以及重結晶處理，制得了高純度的FK506-A產品。本發明所述方法還具有操作簡便、成本低廉的優點，適于工業生產。

附圖說明

圖1是FK506-A的液相-質譜圖。

圖2是FK506-A的¹HNMR譜圖。

圖3是FK506-A的¹³CNMR譜圖。

圖4是FK506-A的HMQC譜圖。

圖5是FK506-A的HMBC譜圖。

圖6是FK506-A的¹H-¹H?cosy譜圖。

具體實施方式