[發明專利]一種高通量提取生物樣本中胡蘿卜素的方法

無效

• 申請號: 201210479345.0
• 申請日: 2012-11-22
• 公開（公告）號: CN102914462A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 董宏偉;徐大剛;吳向陽;蔡楊;陳慧芳;楊曄;吳欣森;李泓全;童海寶
• 申請（專利權）人: 上?；ぱ芯吭?/a>
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 上?？剖⒅R產權代理有限公司 31225
• 代理人: 蔣亮珠

技術領域

本發明涉及類胡蘿卜素生產及研究技術領域，具體地說，是一種通過利用固定于高速振蕩器上的振蕩架，將多組裝有有機溶劑，振蕩破碎珠和待提取樣品的封閉破碎管進行同時振蕩。借助于振蕩破碎珠的碰撞碾磨效應以及有機溶劑的萃取效應，從而將各破碎管中細胞內所含的類胡蘿卜素同時進行溶解抽提，從而實現分析樣本的類胡蘿卜素高通量快速提取。

背景技術

胡蘿卜素(Carotene)最早由Wackenroder在1831年從胡蘿卜中分離出，β-胡蘿卜素的分子式由Willstather在1906年測定，而結構式在1928年-1932年為Zechmeister等確定。胡蘿卜素是一種橙色的光合色素，廣泛存在于綠色和黃色蔬菜以及水果中，使其帶有橙色，并在光合作用中扮演傳遞能量的角色。胡蘿卜素屬于屬四萜類化合物。在其分子的兩端各有一個β-紫蘿酮環，中心斷裂可產生兩個維生素A，是視黃醇(維生素A)的二聚物且擁有多種結構，最主要的兩種是α-胡蘿卜素與β-胡蘿卜素，此外還有γ-胡蘿卜素、δ-胡蘿卜素與ε-胡蘿卜素三種。

β-胡蘿卜素分子式是C₄₀H₅₆，分子量約536.88。由于該化合物分子中具有長的共軛雙鍵生色基團，因而具有光吸收的性質，使其顯黃色，在紫外光譜中有三個吸收峰(455nm，483nm和340nm)。β-胡蘿卜素主要有全反式，9-順式，13-順式及15-順式四種形式，其中天然的β-胡蘿卜素主要是全反式異構體和少量順式異構體。這主要是因為在順式結構中，雙鍵附近的氫原子之間或氫原子和甲基基團之間會產生較大的空間位阻，而造成順式結構的不穩定。9-順式-β-胡蘿卜素在疏水溶劑中溶解容易，結晶困難，通常以油狀物出現，而全反式-β-胡蘿卜素結晶較為容易。

β-胡蘿卜素無臭無味，稀溶液呈橙黃色至黃色，濃度增大時帶橙色，因溶劑極性不同可能稍帶紅色。β-胡蘿卜素的結晶為暗紅紫色六角棱晶或暗紅色菱形片晶。在真空中的熔點為184℃，由于它的分子結構中不存在不對稱碳原子，因而不具備旋光性。β-胡蘿卜素易溶于二硫化碳、二氯甲烷、苯、甲苯、氯仿、四氯化碳、丙酮、石油醚、己烷和植物油，不溶于水，難溶于醚、丙二醇、甘油、丙二醇、甲醇、乙醇、酸和堿。其在橄欖油和苯中的溶解度均為0.1g/mL，在氯仿中的溶解度為43g/l，高濃度時呈橙紅色，低濃度時呈橙色至黃色。β-胡蘿卜素在pH值2～7的范圍內較穩定，且不受還原性物質的影響，但對光和氧均不穩定，易在光照和加熱時發生氧化反應。鐵離子會促使其褪色。