[發明專利]雙峰駝乳鐵蛋白基因、重組蛋白及其克隆方法

無效

• 申請號: 201210478256.4
• 申請日: 2012-11-22
• 公開（公告）號: CN103014006A
• 公開（公告）日: 2013-04-03
• 發明（設計）人: 陳鋼糧
• 申請（專利權）人: 新疆旺源駝奶實業有限公司
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C07K14/79;C12N15/10
• 代理公司: 烏魯木齊合縱專利商標事務所 65105
• 代理人: 湯潔

1.一種雙峰駝乳鐵蛋白基因，其特征在于該基因是一種控制轉鐵蛋白家族的非血紅素鐵結合性糖蛋白合成密切相關的基因，具有SEQ?ID?NO.1中從核苷酸第22-2104位的核苷酸序列，其核苷酸序列與單峰駝乳鐵蛋白核苷酸序列AJ131674.1具有90%的相似性。

2.一種根據權利要求1所述的雙峰駝乳鐵蛋白基因的重組蛋白。

3.根據權利要求2所述的重組蛋白，其特征在于該重組蛋白的核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1。

4.根據權利要求2或3所述的重組蛋白，其特征在于該重組蛋白為SEQ?ID?NO.2所示的氨基酸序列的多肽、或其保守性變異多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

5.根據權利要求2或3所述的重組蛋白，其特征在于該重組蛋白的氨基酸序列為SEQ?ID?NO.2。

6.根據權利要求4所述的重組蛋白，其特征在于該重組蛋白的氨基酸序列為SEQ?ID?NO.2。

7.根據權利要求2或3所述的重組蛋白，其特征在于通過設計一對引物從雙峰駝乳鐵蛋白中得到雙峰駝乳鐵蛋白基因，該引物對的核苷酸序列正向引物為SEQ?ID?NO.3和反向引物為SEQ?ID?NO.4，其序列信息如下：

SEQ?ID?NO.3：5’-?ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC?-3’，

SEQ?ID?NO.4：Oligo?dT。

8.根據權利要求4所述的重組蛋白，其特征在于通過設計一對引物從雙峰駝乳鐵蛋白中得到雙峰駝乳鐵蛋白基因，該引物對的核苷酸序列正向引物為SEQ?ID?NO.3和反向引物為SEQ?ID?NO.4，其序列信息如下：

SEQ?ID?NO.3：5’-?ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC?-3’，

SEQ?ID?NO.4：Oligo?dT。

9.根據權利要求5或6所述的重組蛋白，其特征在于通過設計一對引物從雙峰駝乳鐵蛋白中得到雙峰駝乳鐵蛋白基因，該引物對的核苷酸序列正向引物為SEQ?ID?NO.3和反向引物為SEQ?ID?NO.4，其序列信息如下：

SEQ?ID?NO.3：5’-?ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC?-3’，

SEQ?ID?NO.4：Oligo?dT。

10.一種根據權利要求1所述的雙峰駝乳鐵蛋白基因的克隆方法，按下述步驟進行：第一步，組織分離(Isolation)；第二步，總RNA的分離(Total?RNA?isolation)，總RNA的分離(Total?RNA?isolation)包括提取RNA的準備工作、組織總RNA提取、組織總RNA的鑒定；第三步，全長cDNA的克隆(Cloning?of?Full-length?cDNA)，全長cDNA的克隆(Cloning?of?Full-length?cDNA)包括引物設計及合成、RT-PCR擴增、克隆和測序，該引物對的核苷酸序列正向引物為SEQ?ID?NO.3和反向引物為SEQ?ID?NO.4，其序列信息如下：

SEQ?ID?NO.3：5’-?ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC?-3’，

SEQ?ID?NO.4：Oligo?dT。