[發明專利]抑制A型流感病毒M1蛋白發生磷酸化的方法及其應用

有效

• 申請號: 201210477870.9
• 申請日: 2012-11-22
• 公開（公告）號: CN102964432A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發明（設計）人: 劉文軍;王珊珊;趙振東;劉曉玲;李晶
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C07K14/11
• 分類號: C07K14/11;C12N15/44;C12N15/10;C12N7/00;C12N15/85;A61K39/145;A61P31/16
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種抑制A型流感病毒M1蛋白發生磷酸化的方法及其應用，還涉及A型流感病毒的M1蛋白的磷酸化位點和相關結構域。

背景技術

流行性感冒病毒（influenza?virus），是正粘病毒科（Orthomyxoviridae）流行性感冒病毒(Influenza?virus)屬的代表種，簡稱流感病毒，包括人流感病毒和動物流感病毒。人流感病毒分為甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，是流行性感冒（流感）的病原體。甲型流感病毒抗原性易發生變異，多次引起世界性大流行，例如1918～1919年的大流行中，全世界至少有2000萬～4000萬人死于流感。乙型流感病毒對人類致病性較低。丙型流感病毒只引起人類不明顯的或輕微的上呼吸道感染，很少造成流行。甲型流感病毒于1933年分離成功，乙型流感病毒于1940年獲得，丙型流感病毒直到1949年才成功分離。

甲型流感病毒的RNA由8個節段組成，第1、2、3個節段編碼的是RNA多聚集酶，第4個節段負責編碼血凝素；第5個節段負責編碼核蛋白，第6個節段編碼的是神經氨酸酶；第7個節段編碼基質蛋白（M1蛋白），第8個節段編碼的是一種未知功能的能起到拼接RNA功能的非結構蛋白。

基質蛋白構成了病毒的外殼骨架?；|蛋白與病毒最外層的包膜緊密結合起到保護病毒核心和維系病毒空間結構的作用。當流感病毒在宿主細胞內完成其繁殖之后，基質蛋白是分布在宿主細胞細胞膜內壁上的，成型的病毒核心衣殼能夠識別宿主細胞膜上含有基質蛋白的部位，與之結合形成病毒結構，并以出芽的形式突出釋放成熟病毒。

發明內容

本發明的目的是提供一種抑制A型流感病毒M1蛋白發生磷酸化的方法及其應用。

本發明提供的抑制A型流感病毒的M1蛋白發生磷酸化的方法，是將A型流感病毒的M1蛋白自N末端第132位氨基酸殘基由酪氨酸突變為其它氨基酸。所述其它氨基酸為丙氨酸、苯丙氨酸或天冬氨酸。所述A型流感病毒的M1蛋白具體如序列表的序列1所示。

本發明還提供了一種抑制A型流感病毒的M1蛋白發生磷酸化的方法，是將A型流感病毒中編碼M1蛋白自N末端第132位酪氨酸的密碼子突變為編碼其它氨基酸的密碼子，從而抑制A型流感病毒的M1蛋白發生磷酸化。所述其它氨基酸為丙氨酸、苯丙氨酸或天冬氨酸。所述A型流感病毒的M1蛋白具體如序列表的序列1所示。所述酪氨酸的密碼子具體可為“TAC”，所述丙氨酸的密碼子具體可為“GCC”，所述苯丙氨酸的密碼子具體可為“TTC”，所述天冬氨酸的密碼子具體可為“GAC”。

本發明還提供了一種降低A型流感病毒的M1蛋白磷酸化水平的方法，是將A型流感病毒的基因組中編碼M1蛋白自N末端第132位酪氨酸的密碼子突變為編碼其它氨基酸的密碼子，從而降低A型流感病毒的M1蛋白磷酸化水平。所述其它氨基酸為丙氨酸、苯丙氨酸或天冬氨酸。所述A型流感病毒的M1蛋白具體如序列表的序列1所示。所述酪氨酸的密碼子具體可為“TAC”，所述丙氨酸的密碼子具體可為“GCC”，所述苯丙氨酸的密碼子具體可為“TTC”，所述天冬氨酸的密碼子具體可為“GAC”。

本發明還提供了一種抑制A型流感病毒的M1蛋白自N末端第132位氨基酸殘基發生磷酸化的方法，是將第132位氨基酸殘基的密碼子突變為編碼其它氨基酸的密碼子，從而抑制A型流感病毒的M1蛋白第132位氨基酸殘基發生磷酸化。所述其它氨基酸為丙氨酸、苯丙氨酸或天冬氨酸。所述A型流感病毒的M1蛋白具體如序列表的序列1所示。所述酪氨酸的密碼子具體可為“TAC”，所述丙氨酸的密碼子具體可為“GCC”，所述苯丙氨酸的密碼子具體可為“TTC”，所述天冬氨酸的密碼子具體可為“GAC”。

本發明還保護一種蛋白質，是將A型流感病毒的M1蛋白自N末端的第132位氨基酸殘基由酪氨酸突變為其它氨基酸得到的蛋白質。所述其它氨基酸為丙氨酸、苯丙氨酸或天冬氨酸。所述A型流感病毒的M1蛋白具體如序列表的序列1所示。