[發明專利]利用一種新的轉運信號來實現外源蛋白質的分泌表達無效
| 申請號: | 201210476794.X | 申請日: | 2012-11-22 |
| 公開(公告)號: | CN102925475A | 公開(公告)日: | 2013-02-13 |
| 發明(設計)人: | 陳衛;王光強;宋元達;陳海琴 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N15/75 | 分類號: | C12N15/75;C12N1/21;C12R1/125 |
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| 地址: | 214122 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 利用 一種 轉運 信號 實現 蛋白質 分泌 表達 | ||
1.以枯草芽孢桿菌(Bacillus?subtilis168)分子伴侶GroEL、烯醇酶Eno、鞭毛蛋白質Hag的前50個氨基酸,實現外源蛋白質在枯草芽孢桿菌中分泌表達。
2.如權利要求1所述的應用,其特征在于,利用分子伴侶GroEL、烯醇酶Eno、鞭毛蛋白質Hag的前50個氨基酸作為融合標簽,與外源目的蛋白基因融合,構建融合表達載體,并轉化枯草芽孢桿菌得到枯草芽孢桿菌重組菌,從而實現外源蛋白質的分泌表達。
3.如權利要求2所述的應用,其特征在于,外源目的蛋白基因為編碼具有生物活性的蛋白或酶。
4.如權利要求3所述的應用,其特征在于,所述的重組質粒是將枯草芽孢桿菌分子伴侶GroEL、烯醇酶Eno、鞭毛蛋白質Hag的編碼序列與外源目的蛋白基因融合得到的質粒,重組質粒中含這些蛋白質的前50個氨基酸編碼片段、氨芐青霉素和卡那霉素的抗性選擇標記基因、組成型強啟動子HpaII和外源目的蛋白質的編碼基因,構建的質粒轉化枯草芽孢桿菌。
5.如權利要求4所述的應用,其特征在于,所述的重組枯草芽孢桿菌帶有游離型質粒,含有融合標簽的重組菌株的能實現外源蛋白質的分泌表達。
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