[發明專利]一種測定蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉中蟲草素、腺苷、甘露醇的方法

無效

• 申請號: 201210476352.5
• 申請日: 2012-11-22
• 公開（公告）號: CN102967670A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發明（設計）人: 黃宏南
• 申請（專利權）人: 黃宏南
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 福州科揚專利事務所 35001
• 代理人: 徐開翟;陳智雄

1.一種測定蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉中蟲草素、腺苷、甘露醇的方法，其特征在于利用高效液相色譜—質譜聯用儀同時測定蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉中的蟲草素、腺苷、甘露醇。

2.如權利要求1所述一種測定蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉中蟲草素、腺苷、甘露醇的方法，其特征在于：包括以下步驟：

（一）??樣品處理

精確稱取冬蟲夏草樣本的菌絲體粉0.50?g,均勻研磨、混合,在容量瓶中用超純水定容?,水浴超聲提取30分鐘，然后用0.45μm過濾膜過濾，所得續濾液用高效液相色譜—質譜聯用儀進行測定；

（二）?高效液相色譜—質譜聯用儀的測定條件

（1）液相條件：色譜柱為Thermo?BioBasic-18?PIONEER（150?mm?×?2.1?mm,?i.d.?5?μm）；柱溫為30℃，進樣量為5μl；流動相為0.05?mol/L甲酸-甲醇混合溶液(94:6,?v/v)，流速為0.2?ml/min；

（2）質譜條件：離子源為電噴霧離子源（ESI），蟲草素、腺苷采用正電離模式,甘露醇采用負電離模式;保護氣體(N2)，流速為40?A.U.;輔助氣體(He)，流速為5?A.U.；毛細管溫度為350℃,噴霧電壓為4.0?kV,毛細管電壓是28?V；ESI接口和質譜參數進行優化,以達到最佳；

（三）??繪制標準曲線

分別稱取標準品腺苷、蟲草素、甘露醇適量，用超純水溶解使腺苷和蟲草素的濃度為100mg/L,甘露醇的濃度為500mg/L,作為貯備液；然后分別適量儲備液，用純水稀釋，依次配置腺苷和蟲草素濃度均為10.0?mg/L、20.0?mg/L、30.0?mg/L、40.0?mg/L、50.0?mg/L,甘露醇濃度為100.0?mg/L、200.0?mg/L、300.0?mg/L、400.0?mg/L、500.0?mg/L的混合標準工作液，將混合標準工作液進樣10ul在所述色譜和質譜條件下進行測定，以各組分的峰面積對濃度作回歸分析，得到峰面積-濃度標準曲線。

3.?如權利要求1或2所述的一種測定蝙蝠蛾被毛孢菌絲體粉中蟲草素、腺苷、甘露醇的方法，其特征在于：樣品和標準品的測定采用選擇性離子檢測模式（SIM）進行質譜采集。