[發明專利]一種植物與微生物多糖的純物理制備方法

有效

• 申請號: 201210471031.6
• 申請日: 2012-11-20
• 公開（公告）號: CN102977220A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發明（設計）人: 陳彥;翟天龍;段培魯;丁兢娜;徐存吉;郭文強;王萌萌
• 申請（專利權）人: 安徽大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 安徽合肥華信知識產權代理有限公司 34112
• 代理人: 余成俊

技術領域

本發明涉及一種植物與微生物多糖的制備方法，具體地說是一種提取植物與微生物多糖的純物理制備方法。

背景技術

????多糖是由二十多個單糖到上萬個單糖通過糖苷鍵連接成的一類重要的大分子物質，生物活性多糖主要分為植物多糖、微生物多糖、動物多糖，其作為一種重要的生物體內大分子，與核酸和蛋白質一樣與生物體的機能密切相關。越來越多的研究表明多糖具有抗腫瘤、抗衰老、抗菌、抗氧化、降血糖和調節免疫等功能，因此，多糖具有較好的開發價值和應用價值。而多糖提取工藝一直是研究者關注的重點，針對目前多糖傳統提取工藝的缺陷，本發明提供了一種針對植物多糖與微生物多糖的純物理制備方法，由于發明中涉及超濾膜的選擇，且根據生物種類的不同，多糖分子量呈現出較大差異，分子量范圍可由幾千到幾十萬，為獲得一定分子量范圍的活性多糖，孔徑較大的超濾膜截留分子量大于植物或微生物活性多糖分子量的2-5倍，孔徑較小的超濾膜截留分子量為植物或微生物活性多糖分子量的1/5-1/2。例如本發明選取植物材料：九華山多花黃精（活性多糖分子量8.9KDa）、霍山細莖石斛（活性多糖分子量28KDa），微生物材料：福建古田猴頭菇（活性多糖分子量20KDa）、白茯苓（活性多糖分子量10-40KDa）為代表材料，超濾膜分子量范圍為3-50KDa。

????????目前多糖的提取方法主要采用水提醇沉法，而水提醇沉法存在諸多缺點，例如CN?101255199?A公開了“一種從黃精中提取黃精多糖的方法”，該方法將黃精加熱煎煮0.5-1.5小時，提取多次，醇沉12-36小時，得黃精多糖。該工藝提取時間長，高溫煎煮對多糖結構造成破壞，醇沉過程只能作為粗略分級，且消耗大量酒精，增加了生產成本，難以達到高效、綠色工業化生產需求。CN?101698684?A（一種從人參中提取多糖的方法及應用）和CN?101613418?A（一種提取雙胞蘑菇多糖的方法）等所述，都采用sevage法脫蛋白，需用大量有毒試劑氯仿與正丁醇，操作繁瑣，多糖損失嚴重；醇沉與除蛋白后得到的多糖由于有機試劑的殘存，更不能直接應用于食品、醫藥等領域，而且廢液排放還造成環境污染。因此，常規水提醇沉法已日益不適于當今工業化生產需求。本發明采用高壓均質技術與超濾技術聯用提取多糖，兩種技術的聯用至今未見文獻報道。高壓均質技術已廣泛應用于食品行業的物料細化與乳化，采用高壓均質技術對物料進行超微粉碎，使多糖更容易滲透與擴散，提取率升高，均質過程只需5-10分鐘，耗時短，高壓均質法提取的同時可將與多糖結合的蛋白分離，脫蛋白效果顯著。超濾技術兼有分離、濃縮的功能，具有操作簡單、無相變、能對特定分子量范圍多糖分離等特點。本發明不使用任何有機試劑，兩種技術聯用為天然活性多糖提取提供了一條高效、簡潔、綠色環保的物理制備方法，非常適合工業化生產，具有廣闊的應用前景。

發明內容

本發明目的在于提供一種提取植物與微生物多糖的純物理方法，所要解決的問題是通過高壓均質技術與超濾技術的聯用，使多糖提取率升高，耗時縮短，蛋白含量降低，提取過程無污染。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

植物與微生物多糖的純物理制備方法，包括以下步驟：

（1）將植物或微生物樣品前處理，烘干，根據物料軟硬程度，用粉碎機粉碎2-4次，每次30-50秒，得樣品粉，將樣品粉過60-80目篩；

（2）稱取步驟（1）所得粉末放于容器中，加入10-30倍水，攪拌混勻；

（3）調節低溫循環泵溫度，設置上下限溫度，保證高壓均質機內部工作溫度為4~10℃；

（4）將步驟（2）所得混合物料倒入均質機中，物料首先在低壓強5-10MPa條件下循環2-4次，然后調節閥門壓強為20-100MPa，待壓強穩定后，均質1-3次；

（5）將步驟（4）所得均質液離心15-22min，收集上清液，殘渣烘干保存；

（6）將步驟（5）得到的上清液進行超濾分離，分為一次超濾和二次超濾，分別設置兩次超濾條件；

（7）一次超濾選用截留分子量大于樣品活性多糖分子量2-5倍的超濾膜進行分離，保留透過液，去除截留液；

（8）將步驟（7）所得樣品透過液進行二次超濾，超濾膜截留分子量為樣品活性多糖分子量的1/5-1/2,保留截留液；

（9）將步驟（8）所得截留液濃縮到原體積的1/9-1/10，冷凍干燥即得樣品活性多糖；

（10）檢測樣品多糖蛋白含量與糖含量。

所述的步驟（1）中烘干溫度為40~45℃。