[發明專利]殺蟲蛋白質、其編碼基因及用途

有效

• 申請號: 201210470412.2
• 申請日: 2012-11-19
• 公開（公告）號: CN102993282A
• 公開（公告）日: 2013-03-27
• 發明（設計）人: 龐潔;張愛紅;劉海利;焦國偉;岳健婷;李曉嬌;張進峰;程翠娟;趙麗媛
• 申請（專利權）人: 北京大北農科技集團股份有限公司;北京大北農科技集團股份有限公司生物技術中心
• 主分類號: C07K14/325
• 分類號: C07K14/325;C12N15/32;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/13;C12N1/19;C12N1/21;C12N7/01;C12P21/02;A01H5/00;A01N63/02;A01P7/04
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1.一種殺蟲蛋白質，其特征在于，包括：

（a）具有SEQ?ID?NO:2所示的氨基酸序列組成的蛋白質；或

（b）在（a）中的氨基酸序列經過取代和/或缺失和/或添加一個或幾個氨基酸且具有殺蟲活性的由（a）衍生的蛋白質；或

（c）與SEQ?ID?NO:2具有至少90%序列同一性的氨基酸序列組成的蛋白質。

2.根據權利要求1所述殺蟲蛋白質，其特征在于，所述殺蟲蛋白質為與SEQ?ID?NO:2具有至少95%序列同一性的氨基酸序列組成的蛋白質。

3.根據權利要求1所述殺蟲蛋白質，其特征在于，所述殺蟲蛋白質為與SEQ?ID?NO:2具有至少99%序列同一性的氨基酸序列組成的蛋白質。

4.一種殺蟲基因，其特征在于，包括：

（a）編碼權利要求1-3任一項所述殺蟲蛋白質的核苷酸序列；或

（b）在嚴格條件下與（a）限定的核苷酸序列雜交且編碼具有殺蟲活性的蛋白質的核苷酸序列；或

（c）具有SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列。

5.一種表達盒，其特征在于，包含在有效連接的調控序列調控下的權利要求4所述殺蟲基因。

6.一種包含權利要求4所述殺蟲基因或權利要求5所述表達盒的重組載體。

7.一種包含權利要求4所述殺蟲基因或權利要求5所述表達盒的轉基因宿主生物，其特征在于，包括植物細胞、動物細胞、細菌、酵母、桿狀病毒、線蟲或藻類。

8.根據權利要求7所述轉基因宿主生物，其特征在于，所述植物為玉米、大豆、棉花、水稻、小麥、高粱、牧草或甘蔗。

9.一種產生殺蟲蛋白質的方法，其特征在于，包括：

獲得權利要求7或8所述轉基因宿主生物的細胞；

在允許產生殺蟲蛋白質的條件下培養所述轉基因宿主生物的細胞；

回收所述殺蟲蛋白質。

10.一種用于增加昆蟲靶范圍的方法，其特征在于，包括：將權利要求1-3任一項所述殺蟲蛋白質或權利要求5所述表達盒編碼的殺蟲蛋白質在植物中與至少一種不同于權利要求1-3任一項所述殺蟲蛋白質或權利要求5所述表達盒編碼的殺蟲蛋白質的第二種殺蟲核苷酸一起表達。

11.根據權利要求10所述用于增加昆蟲靶范圍的方法，其特征在于，所述第二種殺蟲核苷酸可以編碼Cry類殺蟲蛋白質、Vip類殺蟲蛋白質、蛋白酶抑制劑、凝集素、α-淀粉酶或過氧化物酶。

12.根據權利要求10所述用于增加昆蟲靶范圍的方法，其特征在于，所述第二種殺蟲核苷酸為抑制目標昆蟲害蟲中重要基因的dsRNA。

13.一種產生抗蟲植物的方法，其特征在于，包括：將權利要求4所述殺蟲基因或權利要求5所述表達盒或權利要求6所述重組載體導入植物。

14.根據權利要求13所述產生抗蟲植物的方法，其特征在于，所述植物為玉米、大豆、棉花、水稻、小麥、高粱、牧草或甘蔗。

15.一種用于保護植物免受由昆蟲害蟲引起的損傷的方法，其特征在于，包括：將權利要求4所述殺蟲基因或權利要求5所述表達盒或權利要求6所述重組載體導入植物，使導入后的植物產生足夠保護其免受昆蟲害蟲侵害量的殺蟲蛋白質。

16.根據權利要求15所述用于保護植物免受由昆蟲害蟲引起的損傷的方法，其特征在于，所述植物為玉米、大豆、棉花、水稻、小麥、高粱、牧草或甘蔗。

17.一種控制昆蟲害蟲的方法，其特征在于，包括：使昆蟲害蟲與抑制量的權利要求1-3任一項所述殺蟲蛋白質或由權利要求4所述殺蟲基因編碼的昆蟲抑制性蛋白質接觸。

18.根據權利要求17所述控制昆蟲害蟲的方法，其特征在于，所述昆蟲害蟲是鱗翅目昆蟲害蟲。