[發明專利]一種基于譜效關系的蜂膠質量控制方法

有效

• 申請號: 201210469997.6
• 申請日: 2012-11-19
• 公開（公告）號: CN102980952A
• 公開（公告）日: 2013-03-20
• 發明（設計）人: 林勵;陳南迪;譚東山
• 申請（專利權）人: 廣州市譚山蜂業有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N21/78;G01N21/31
• 代理公司: 廣州凱東知識產權代理有限公司 44259
• 代理人: 宋冬濤

【技術領域】

本發明屬于中藥質量標準技術領域，具體是用于預測蜂膠樣品抗氧化活性以評價其質量的一種基于譜效關系的蜂膠質量控制方法。?

【背景技術】

蜂膠是工蜂從植物新生枝芽或樹枝上采集的樹脂，并混入蜜蜂上顎腺分泌物和蜂蠟等加工而成的具有芳香粘性的固體膠狀物。蜂膠含有黃酮類、萜烯類、酚類及酯類等生物活性物質，其中黃酮類化合物具有顯著的抗氧化活性。在2011年國家食品藥品監督管理局新批準的以蜂產品為原料的62個保健食品中，以蜂膠為原料的保健品有57個，占所有蜂產品保健食品的91.94%。蜂膠保健食品在我國蜂產品保健食品，乃至所有保健食品中的地位可見一斑（胡福良.2011-2012年我國蜂膠市場的回顧與展望[J].中國蜂業,2012，Z1：27-30.）。但是，目前市場上的蜂膠質量層次不齊，導致蜂膠產品的質量及藥效顯著下降，現行蜂膠質量標準往往難以科學地評價蜂膠質量的優劣。?

【發明內容】

本發明的目的在于針對以上所述現有技術存在的不足，提供借助化學計量學方法，將蜂膠的指紋圖譜與抗氧化活性進行譜效相關性研究以獲得預測其抗氧化活性判斷蜂膠質量優劣的一種基于譜效關系的蜂膠質量控制方法。?

本發明建立直接判斷蜂膠抗氧化作用強弱的譜效數學模型，僅根據指紋圖譜的特征峰和譜特征峰組，通過本譜效數學模型，不用做抗氧化試驗即可直接判斷蜂膠抗氧化作用的強弱。?

為了實現上述目的，本發明是這樣實現的：一種基于譜效關系的蜂膠質量控制方法，通過建立蜂膠HPLC指紋圖譜，僅根據HPLC指紋圖譜的特征峰和特征峰組識別，通過譜效數學模型直接判斷蜂膠抗氧化作用的強弱。?

一種基于譜效關系的蜂膠質量控制方法，其步驟如下：?

1、建立蜂膠HPLC（高效液相色譜）指紋圖譜?

供試品溶液：取蜂膠藥材粉末，精密稱定約1.0000g，置于索氏提取器中，以100mL丙酮索氏提取至無色，提取液水浴蒸干，殘渣以甲醇溶解，置于100mL量瓶中，用甲醇定容至100mL刻度。?

色譜條件為：色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料；流動相為：A:甲醇，B：體積比濃度為0.4%的磷酸溶液；采用梯度洗脫方式：0min→10min→20min→30min→38min→56min→67min→72min→79min→90min→98min→105min→109min→113min→120min,甲醇：35%→35%→45%→45%→50%→55%→55%→58%→60%→65%→69%→76%→87%→98%→98%，體積比濃度為0.4%的磷酸溶液：65%→65%→55%→55%→50%→45%→45%→42%→40%→35%→31%→24%→13%→2%→2%；流速：1mL/min,檢測器：二極管陣列檢測器；檢測波長：283nm；柱溫：25℃；進樣量：15μL。?

2、提取特征色譜峰和特征峰組?

根據蜂膠的HPLC指紋圖譜，識別特征峰，特征峰保留時間分別為：3.7min、8.1min、13.9min、15.2min、17.1min、24.2min、35.5min、36.7min、40.2min、46.3min、58.9min、69.8min、71.9min、73.3min、74.5min、75.9min、78.2min、81.5min、84.7min、91.9min、93.5min、99.1min、102.4min、103.3min、104.3min25個特征峰,特征峰光譜圖見說明書附圖2-26；特征峰組5個，分別的保留時間分別為：46.3-58.9min、58.9-69.8min、84.7-91.9min、93.5-99.1min、99.1-102.4min。?

3、將所識別特征峰和特征峰組的峰面積代入通過多遠回歸構建的譜效數學模型?

X₁代表1號（即保留時間為3.7min）色譜峰峰面積，X₂代表2號（即保留時間為8.1min）色譜峰峰面積，X₂代表2號色譜峰峰面積，X_n代表n號色譜峰峰面積,n位自然數；Z為所有共有特征峰和特征峰組峰面積之和，即Z=X₁+X₂+X₃+X₄+X₅……X₃₀；?