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[發明專利]一種人骨巨細胞瘤細胞株及其應用無效

專利信息
申請號: 201210467585.9 申請日: 2012-11-19
公開(公告)號: CN102943065A 公開(公告)日: 2013-02-27
發明(設計)人: 華瑩奇;蔡鄭東;尹飛;孫偉;王卓瑩;鄭龍坡;曾輝;孫夢熊 申請(專利權)人: 上海市第十人民醫院
主分類號: C12N5/09 分類號: C12N5/09;C12Q1/02;A01K67/027
代理公司: 上海申新律師事務所 31272 代理人: 劉懿
地址: 200072 *** 國省代碼: 上海;31
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 巨細 細胞株 及其 應用
【說明書】:

技術領域

發明涉及一種細胞株,尤其涉及一種人骨巨細胞瘤細胞株及其應用。

背景技術

骨巨細胞瘤(giant?cell?tumor?of?bone,簡稱GCT)是一種常見的原發性骨腫瘤,占原發骨腫瘤的20%。一般認為它屬良性,曾被稱為“良性骨巨細胞瘤(Blood-?good)”。但是按良性腫瘤常規方法治療后卻容易復發,近年來它被放在良、惡性之間的位置,屬中間性(Intermediate)或侵襲性(Aggressive)腫瘤。骨巨細胞瘤病因不明,有幾種不同說法。骨巨細胞瘤主要組織成分為類似破骨細胞的巨細胞和比較瘦小的梭形或圓形的基質細胞。由于巨細胞很象破骨細胞,英國學者Stewart稱之為“破骨細胞瘤”。不過多數人認為基細胞(Stroma?cell)是主要的,可能來自未分化結締組織細胞(Undif?ferentiated?con-nective?tissue?cell)。也有人認為基細胞來自未分化中胚細胞(Undifferen?tiated?mesenchymal?cell),并轉化成巨細胞。又有人認為它們屬內皮細胞來源。還有人將之歸屬纖維組織細胞(Fibroushistiocytic?cell)來源。骨巨細胞瘤生物學行為復雜,多變。

GCT具有明顯的局部侵襲性,復發率高,并可發生轉移骨巨細胞瘤。目前治療方法主要以手術治療為主,采用切刮術加滅活處理,植入自體或異體松質骨或骨水泥,但易復發,復發率達40~70%。而廣泛的擴大切除或節段截除術將嚴重影響患者肢體功能,且同樣具有相對較高的復發率(10%左右)。再加上對化療無效,放療后也易肉瘤變,所以GCT的治療一直比較棘手,醫生能選擇的治療方法也少之又少。加快GCT在基礎及臨床上的研究勢在必行。

目前,在細胞水平上對骨巨細胞瘤的研究主要是通過臨床活體標本培養出原代細胞再加以研究,相關文獻報道也比較少。而對于骨巨細胞瘤特別是惡性骨巨細胞瘤這種稀有的腫瘤,臨床活體標本是很難得到的,再加上原代細胞經過很有限傳代后就會死亡或失去原有的特征,這大大限制了對骨巨細胞瘤的研究.目前,布達佩斯條約國際確認的培養物保藏單位還沒有收錄骨巨細胞瘤細胞株。建立GCT細胞株的相關文獻也僅有1993年來自日本的一篇(Establishment?of?a?Cell?Line?from?a?Human?Giant?Cell?Tumor?of?Bone),且文獻中所提到的細胞株CG-1現在已無法得到。

發明內容

本發明的目的是提供了一種人骨巨細胞瘤細胞株及其應用。

本發明提供的人骨巨細胞瘤細胞株為人骨巨細胞瘤細胞株GCT-WF,保藏編號為CCTCC?NO.C2012101,于2012年9月18日保藏于中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC,地址:武漢市武昌區珞珈山武漢大學)。

所述人骨巨細胞瘤細胞株GCT-WF?CCTCC?NO.C2012101可作為研究骨巨細胞瘤發生、骨巨細胞瘤發展或骨巨細胞瘤轉移的細胞模型。

所述人骨巨細胞瘤細胞株GCT-WF?CCTCC?NO.C2012101可用于建立骨巨細胞瘤動物模型。

所述人骨巨細胞瘤細胞株GCT-WF?CCTCC?NO.C2012101可應用于篩選和/或研制治療骨巨細胞瘤藥物。

本發明提供的人骨巨細胞瘤GCT-WF可以用于在細胞水平上研究骨巨細胞瘤的發生、發展和轉移的機理,建立骨巨細胞瘤動物模型,并將其作為靶標篩選或研制抗癌藥物。

附圖說明

圖1為本發明人骨巨細胞瘤GCT-WF細胞在顯微鏡下觀察的細胞形態圖。

具體實施方式

下面參照附圖,結合具體實施例對本發明所述的人骨巨細胞瘤細胞株GCT-WF?CCTCC?NO.C2012101進行詳細的介紹和描述,以更好的理解本發明,但是應當理解的是,下述實施例并不限制本發明范圍。

下述實施例中的方法,如無特別說明,均為常規方法。

1.骨巨細胞瘤標本的獲得

本發明的骨巨細胞瘤標本來自于一骨巨細胞瘤患者,該患者為男性,35歲,進行右股骨上段骨巨細胞瘤切除手術。從手術切除標本中選取活性良好腫瘤組織數塊作為本發明的骨巨細胞瘤標本。

2.原代培養

采用組織塊貼壁法進行骨巨細胞瘤細胞的原代培養,使用含10%胎牛血清的DMEM?培養基,37℃,CO2濃度為5%,飽和濕度下培養,直至培養皿中的細胞長至80%左右。

3.傳代培養

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