[發(fā)明專利]一種魚類致病菌香魚假單胞菌的LAMP檢測試劑盒及檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210466878.5
• 申請日: 2012-11-16
• 公開（公告）號: CN102952884A
• 公開（公告）日: 2013-03-06
• 發(fā)明（設計）人: 王國良;張繼挺;周濤
• 申請（專利權(quán)）人: 寧波大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/38
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

1.一種魚類致病菌香魚假單胞菌的LAMP檢測試劑盒，其特征在于：該試劑盒包括10×ThermoPol?反應緩沖液、濃度為100mM的MgSO₄溶液、濃度為10?mM的dNTP液、濃度為5M的甜菜堿溶液、濃度為8?U?/μL?的Bst?DNA?聚合酶液、FIP?/?BIP引物溶液、F3?/?B3引物溶液和雙蒸水，所述FIP?/?BIP引物溶液含有FIP引物和BIP引物，所述FIP引物的核苷酸序列為：GCGTTCTTGCTGGCGCAGGTCGATGTACTGGTCGAGCGT，?所述BIP引物的核苷酸序列為：TGCCGCGTGCCGACTTTTGGCCAGGTCACCGG，?所述FIP引物和所述BIP引物的濃度都為1.6～2.4μM，所述F3?/?B3引物溶液含有F3引物和B3引物，所述F3引物的核苷酸序列為：TCTGTTCATGCCGATCAAGC，所述B3引物的核苷酸序列為：GCAGCTGCCCACTTGGT，?所述F3引物和B3引物的濃度都為0.4～0.6μM。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚類致病菌香魚假單胞菌的LAMP檢測試劑盒，其特征在于所述的LAMP檢測試劑盒的100×25μL反應體系配制方法如下：10×ThermoPol?反應緩沖液250μL、濃度為100mM的MgSO₄溶液50μL、濃度為10?mM的dNTP液300μL、濃度為8?U?/μL?的Bst?DNA?聚合酶液100μL、濃度為5M的Betaine溶液400μL、引物濃度都為1.6～2.4μM的FIP?/?BIP引物溶液50μL、濃度都為0.4～0.6μM的F3?/?B3引物溶液50μL，余量用雙蒸水補足。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚類致病菌香魚假單胞菌的LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述的ThermoPol?反應緩沖液的終濃度配制方法如下：200mMTris-Hcl，100?mM?KCl，20?mM?MgSO₄，100?mM?(NH₄)₂SO₄，1.0％TritonX-100，pH8.8。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種魚類致病菌香魚假單胞菌的LAMP檢測試劑盒，其特征在于：所述的LAMP檢測試劑盒還包括有陽性對照液和陰性對照液，所述的陽性對照液含有香魚假單胞菌陽性DNA，所述的陰性對照液為雙蒸水。