[發明專利]一種溶藻弧菌的PCR檢測引物

無效

• 申請號: 201210466094.2
• 申請日: 2012-11-16
• 公開（公告）號: CN103820533A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 謝克煥
• 申請（專利權）人: 大連德通生物技術開發有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/63
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明主要涉及海產品疾病檢測技術領域，具體涉及海產品致病微生物檢測方法，尤其是一種溶藻弧菌PCR檢測引物。

背景技術

我國海域遼闊，自然條件優越，海洋資源十分豐富。但目前開發利用的程度還很低。這也說明我國開發利用海洋資源的潛力巨大，遼寧海域是中國重要的海洋生物資源、漁業資源寶庫，其盛產海參、扇貝、貽貝、牡蠣和魚、蝦以及藻類等，帶動海洋經濟發展。加強多邊和雙邊的海洋開發國際合作，集中集約開發利用海域及海島資源，合理配置優勢海洋產業，科學高效開發海洋資源，積極開展科研與試驗、開發與利用，海水養殖標準化是合理開發海水養殖資源的重要手段，研究制定海產品養殖標準，合理開發海水灘涂養殖資源，提高養殖海產品疾病是當今養殖業的重點內容。

海產品養殖是一項高風險的養殖業，傳統的小戶的海產品養殖給養殖戶帶來了巨大的市場和技術風險。為了將養殖戶養殖風險降到最低，開展對各類養殖業，包括魚、蝦、蟹、海參、鮑魚、貝類、海藻等各類海產品的疾病防治工作任務舉足輕重。有報道稱，霍亂弧菌、漂浮弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、創傷弧菌等有害細菌，是引起海產品各種疾病的罪魁禍首。

其中，殺鮭氣單胞菌Aeromonas?salmonida、中間氣單胞菌Aeromonas?media和海弧菌生物變種ⅠVibro?pelagius?biovar?Ⅰ均可引起刺參表皮潰爛病，癥狀為：發病初期，病參有搖頭現象，圍口腔膜松弛，觸手對外界刺激反應遲鈍，繼而出現排臟現象；發病中期，刺參口腹部出現小面積潰爛，形成小白斑，潰爛面積逐漸增大，口部腫大，不能收縮與閉合，逐漸失去攝食能力；發病末期，刺參體表大面積潰爛，身體收縮，溶解成粘膠狀。

假交替單胞菌Psevdoalteromonas?nigrifaciens可導致保苗期腐皮綜合征：病參首先口部腫大，觸手不能完全合攏；然后口部出現潰爛白斑，直至參體大面積潰爛，導致最終死亡。

燦爛弧菌Vibrio?splendidus可導致耳狀幼體爛胃病、幼參急性口圍腫脹癥和養成期刺參腐皮綜合征等。發病癥狀：幼體：在顯微鏡下可見耳狀幼體胃壁增厚、萎縮、潰爛。幼參：活力下降，身體萎縮，口圍腫脹，排臟，體表潰爛，管足松弛失去附著力，脫落至池底，最后死亡。養成期：首先觸手過度伸張，逐步失去伸展活力，口部腫大，體表分泌粘液增多；然后，口部出現潰爛白斑，從小到大。嚴重者身體發生潰爛，最終導致死亡。

弧菌Vibro?tapetis和病菌Marinomonas?dokdonensis均可導致幼參急性口圍腫脹癥：病參活力下降，身體萎縮，口圍腫脹，排臟，體表潰爛，管足松弛失去附著力，脫落至池底，最后死亡。弧菌Vibrio?lentus還可導致耳狀幼體爛邊病：在顯微鏡下可見耳狀幼體邊緣突起處組織增生，顏色加深變黑，邊緣變得模糊不清，逐步潰爛，最后整個幼體解體消失。存活個體的發育遲緩、變態率低，即使幼體能變態附板1周左右也大多“化板”消失。

藻弧菌(Vibrio?alginolyticus)和燦爛弧菌(V.splendidus)是水產養殖業中常見的致病菌，對水生動物包括魚類、雙殼貝類、甲殼類和棘皮動物等的養殖造成了巨大的損失，溶藻弧菌對人的臨床感染也屢見報道，燦爛弧菌還可作為致病微生物之一；

世界海參養殖以刺參（溫帶種）和糙海參（熱帶種）為主要品種。除中國、日本、韓國主要養殖刺參外，其他國家均以糙海參為主要養殖對象。近年來，隨著自然資源的減少和消費需求的增加，海參的人工養殖在一些國家逐漸興起。其中，中國和日本是主要的養殖國家，印度、印度尼西亞、越南、菲律賓、韓國、埃及等也有小規模的增養殖。

刺參(Apostichopus?japonicus)是我國有記載的20余種食用海參中價值最高、惟一分布于黃渤海域的溫帶種。其蛋白質含量高,糖類豐富,脂類含量低,且不含膽固醇,具有很高的營養保健和藥用價值,被人們視為重要的海珍品,因而具有重要的市場價值。近年來,海參消費需求量的逐年增加導致了世界范圍內海參自然資源的過度開發和種群數量的急劇下降，因此，海參的人工養殖也隨之發展起來。隨之而來的是海參養殖中遇到的各類問題。