[發(fā)明專(zhuān)利]一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210465665.0
• 申請(qǐng)日: 2012-11-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102965417A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-03-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沈聯(lián)兵;周云;李文豪;何連明;姚明高
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 宜昌三峽制藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P19/52
• 分類(lèi)號(hào): C12P19/52
• 代理公司: 宜昌市三峽專(zhuān)利事務(wù)所 42103
• 代理人: 彭婭

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法。

背景技術(shù)

國(guó)內(nèi)現(xiàn)有的新霉素發(fā)酵使用的原料主要是糧食加工類(lèi)原料，如碎米、花生餅、黃豆餅等，為了能夠提高這些原材料的生物利用度，通常情況下需要將上述原料進(jìn)行粉碎過(guò)篩，制成米粉、花生粉和黃豆粉。

為了節(jié)省成本，目前，制造企業(yè)長(zhǎng)期使用花生餅作為新霉素發(fā)酵生產(chǎn)原料，花生餅主要是由花生經(jīng)過(guò)熱榨或冷榨之后得到的剩余物，由于花生餅多為農(nóng)間小作坊生產(chǎn)，存在質(zhì)量不穩(wěn)定，質(zhì)量不均一的情況，因小作坊加工控制不嚴(yán)而導(dǎo)致黑色花生餅的情況發(fā)生（正常的花生餅應(yīng)為棕褐色），黑色花生餅在經(jīng)過(guò)粉碎過(guò)篩后顏色不易辨別，企業(yè)將黑色花生餅應(yīng)用于新霉素發(fā)酵生產(chǎn)后，使得發(fā)酵代謝異常，菌絲畸形嚴(yán)重，給發(fā)酵生產(chǎn)帶來(lái)了非常大的不利影響。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，可以解決花生餅質(zhì)量不穩(wěn)定的問(wèn)題，有效的保障了新霉素發(fā)酵生產(chǎn)。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，其特征在于該方法由以下步驟組成：

1）培養(yǎng)斜面孢子：將砂土孢子經(jīng)密封，干燥后，于0～4℃貯藏制得斜面孢子；

2）培養(yǎng)斜面孢子懸浮液：將斜面孢子于28±2℃，4～12天培養(yǎng)制得斜面孢子懸浮液；

3）種子罐培養(yǎng)：將斜面孢子懸浮液放入種子培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，種子罐中花生粕的質(zhì)量含量為種子罐培養(yǎng)液質(zhì)量的1～2%；

4）發(fā)酵罐培養(yǎng)：將經(jīng)種子罐培養(yǎng)的培養(yǎng)液送入發(fā)酵培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，發(fā)酵罐中的培養(yǎng)液中的花生粕的質(zhì)量含量為發(fā)酵罐培養(yǎng)液質(zhì)量的0～4%；

5）向發(fā)酵液中加入732樹(shù)脂，將發(fā)酵液濃度稀釋至13000u/ml以下，中和至pH值6.4～7.0制得稀發(fā)酵液，完成發(fā)酵步驟。

步驟3）中，種子罐中的花生粕的質(zhì)量含量為種子罐培養(yǎng)液質(zhì)量的1%。

步驟3）中，發(fā)酵罐中的花生粕的質(zhì)量含量為發(fā)酵罐培養(yǎng)液質(zhì)量的2%。

花生粕是以脫殼花生果為原料經(jīng)有機(jī)溶劑提取或預(yù)壓浸提法提取油脂后的副產(chǎn)品。

花生粕替代花生餅后種子罐和發(fā)酵罐中培養(yǎng)液配方比例的變化如表1所示（%為質(zhì)量百分比）：

表1

本發(fā)明提供的一種硫酸新霉素發(fā)酵的方法，有益效果如下：

1、解決了花生餅質(zhì)量不穩(wěn)定的難題

由于新霉素發(fā)酵工藝中大量使用糧食類(lèi)加工產(chǎn)品作為微生物發(fā)酵的碳源和氮源，因此，糧食類(lèi)原材料的質(zhì)量穩(wěn)定性對(duì)于新霉素發(fā)酵生產(chǎn)水平和工藝控制至關(guān)重要。花生餅作為花生作物的粗加工副產(chǎn)品，存在著產(chǎn)量低、供應(yīng)無(wú)保障、制備工藝粗糙、質(zhì)量不穩(wěn)定、產(chǎn)品均一性難以保障等諸多缺點(diǎn)。長(zhǎng)期以來(lái)，新霉素發(fā)酵生產(chǎn)水平波動(dòng)和工藝控制偏差都與花生餅原料的質(zhì)量不穩(wěn)定有著密切的聯(lián)系。通過(guò)使用花生粕替代花生餅用于硫酸新霉素發(fā)酵，很好的解決了這一難題，花生粕來(lái)自于工業(yè)化大生產(chǎn)的油脂加工企業(yè)，其質(zhì)量穩(wěn)定可靠、供應(yīng)有保障，能夠滿(mǎn)足企業(yè)新霉素發(fā)酵生產(chǎn)的工藝要求。

2、解決了花生餅質(zhì)量不均一的難題

花生餅的來(lái)源絕大多數(shù)是農(nóng)村個(gè)體小作坊，其質(zhì)量均一性很難保障，往往一批的花生餅中混有數(shù)個(gè)甚至數(shù)十個(gè)不同來(lái)源的產(chǎn)品，新霉素生產(chǎn)企業(yè)現(xiàn)行的產(chǎn)品抽樣檢驗(yàn)程序和工藝控制管理都無(wú)法避免和解決這一問(wèn)題。而花生粕來(lái)自于大型的油脂加工企業(yè)，其企業(yè)規(guī)模大，生產(chǎn)穩(wěn)定，有良好的工藝控制和質(zhì)量管理，來(lái)自于這樣企業(yè)的花生粕其質(zhì)量穩(wěn)定，產(chǎn)品均一，很好的解決了原材料質(zhì)量不均一導(dǎo)致生產(chǎn)發(fā)生波動(dòng)的難題，對(duì)穩(wěn)定企業(yè)新霉素發(fā)酵生產(chǎn)起到了非常積極的作用。

3、減少了影響發(fā)酵生產(chǎn)的主要波動(dòng)因素

新霉素發(fā)酵生產(chǎn)受原材料、蒸汽、空氣、攪拌、工藝控制等多因素的影響，往往在生產(chǎn)遇到波動(dòng)的時(shí)候，需要判斷和排除的因素非常多。在以往的生產(chǎn)中，花生餅的質(zhì)量狀況是影響新霉素發(fā)酵生產(chǎn)的一個(gè)重要因素，在生產(chǎn)發(fā)生波動(dòng)時(shí)，往往需要通過(guò)搖瓶試驗(yàn)，增加檢驗(yàn)項(xiàng)目或?qū)ｍ?xiàng)大罐試驗(yàn)來(lái)判斷和評(píng)估花生餅對(duì)生產(chǎn)的影響程度，由于花生餅質(zhì)量不穩(wěn)定，產(chǎn)品不均一，給判斷和評(píng)估帶來(lái)了非常大的困難。而花生粕在應(yīng)用后，在新霉素發(fā)酵生產(chǎn)表現(xiàn)非常穩(wěn)定，即使在生產(chǎn)遇到波動(dòng)的時(shí)候，也能夠準(zhǔn)確的判斷和評(píng)估其對(duì)生產(chǎn)的影響程度，降低了生產(chǎn)波動(dòng)后對(duì)發(fā)酵工藝控制和調(diào)整的難度。

4、提高了供貨的可靠性，有效的保障了新霉素發(fā)酵生產(chǎn)