[發(fā)明專利]一種抑制破骨細胞形成的紅花提取物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210464419.3
• 申請日: 2012-11-16
• 公開（公告）號: CN103816197A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發(fā)明（設計）人: 邢秋苓
• 申請（專利權）人: 邢秋苓
• 主分類號: A61K36/286
• 分類號: A61K36/286;A61P19/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明涉及紅花提取物,尤其是涉及抑制破骨細胞形成的紅花提取物。?

背景技術

隨著世界人口老齡化日趨明顯，骨質疏松癥的發(fā)病率逐年升高，由骨質疏松癥所致的骨痛和骨折直接影響了中老年人的生存質量,已經(jīng)成為嚴峻的社會問題。人體的骨骼通過不斷的骨生成和骨吸收，一直在進行著改造，這種改造叫骨改造。在年輕時骨生成和骨吸收保持著良好的平衡，但隨著年齡的增長，由于各種原因該平衡傾向于骨吸收，長時間持續(xù)該狀態(tài)的話會使得骨組織變脆，導致發(fā)生骨質疏松癥、骨折等各種骨疾病。在人體里，破骨細胞是有骨吸收的唯一細胞。研究表明，破骨細胞形成變得異常活躍時，將引發(fā)上述由于骨損失引起的骨質疏松癥(osteoporosis)等各種骨疾病。因此，抑制破骨細胞的形成與骨吸收機能是一種非常有效的治療骨質疏松癥的方法。?

目前已開發(fā)出多種抑制破骨細胞形成的預防和治療骨質疏松癥的藥物和方法，但由于具有價格高，長期服用引起多種副作用，因而使用上都有一定的局限性。比起合成新藥，天然藥物成分具有安全，價廉的優(yōu)點。?

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種來源于天然藥物的，具有抑制破骨細胞形成的植物成分。?

為了實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明采用以紅花為天然藥物資源，通過多種溶劑提取法和分離方法以及在提取、分離過程中緊密配合得到的提取物或組分對破骨細胞形成的作用的實驗，最終得到具有顯著破骨細胞抑制作用的紅花提取物。?

具有抑制破骨細胞形成的紅花提取物的提取方法為如下：?

①取干燥的紅花,用乙醇回流提取1-3次,冷藏過夜,過濾,濾液減壓回收乙醇,得乙醇浸膏；?

②將乙醇浸膏加入蒸餾水熱溶,然后用有機溶劑萃取,減壓回收溶劑,得浸膏I；?

③將浸膏I用2-10倍量的乙醇溶解,冷藏過夜,過濾,濾液減壓回收乙?醇,即得抑制破骨細胞形成的紅花提取物。?

在本發(fā)明的優(yōu)選技術方案中，在步驟①所述的乙醇為60-80%的乙醇溶液。?

在本發(fā)明的另一優(yōu)選技術方案中，在步驟②所述的有機溶劑為含有1-6個碳原子的醇，烷或酯類。?

在本發(fā)明的再一優(yōu)選技術方案中，在步驟③所述的乙醇為30-100%的乙醇溶液。?

紅花為常用中草藥，主要用于經(jīng)閉、痛經(jīng)、惡露不行、癥瘕痞塊、跌打損傷。古人常有於血在體內時，常加紅花一小把:紗布包煮開可用一天兩次泡腳,適用各種靜脈曲張,末梢神經(jīng)炎,血液循環(huán)。活血能經(jīng)；祛瘀止痛，紅花味辛、性溫，歸心、肝經(jīng)。氣香行散，入血分具有活血通經(jīng)，祛瘀止痛的功效主治痛經(jīng)，經(jīng)閉，產(chǎn)后血暈，瘀滯腹痛，胸痹心痛，血積，跌打瘀腫，關節(jié)疼痛，中風癱瘓，斑疹紫暗。紅花雖有上述多種功效，并配合其他中草藥用于骨質疏松癥的治療，但尚沒有紅花提取物抑制破骨細胞形成的報告。?

本發(fā)明的紅花提取物具有很好的抑制破骨細胞形成的作用，并來源與天然藥物，副作用少，使用安全。?

本發(fā)明的紅花提取物，提取方法簡單，易于工業(yè)化生產(chǎn)。?

具體實施方式

下述非限制性實施例可以使本領域的普通技術人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。?

實施例1?

1.紅花提取物的提取?

①取干燥的紅花,用3倍70%乙醇回流提取2次,每次2個小時，合并提取液，冷藏過夜,過濾,濾液減壓回收乙醇,得乙醇浸膏；?

②將乙醇浸膏加入5倍量的蒸餾水熱溶,然后用乙酸乙酯萃取,減壓回收溶劑,得浸膏I；?

③將浸膏I用5倍量的80%乙醇溶解,冷藏過夜,過濾,濾液減壓回收乙醇,即得抑制破骨細胞形成的紅花提取物。?

2.紅花提取物對破骨細胞形成的作用?

破骨細胞的形成體系：采用RAW264.7細胞在RANKL存在下，在α-MEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)3-5天就可形成為多核的破骨細胞。形成的破骨細胞用抗酒石酸酸性?磷酸酶(TRAP)染色法觀察TRAP陽性多核細胞，在顯微鏡下數(shù)3個以上細胞核的TRAP陽性多核細胞，作為破骨細胞形成的指標。?

所述RAW264.7為細胞小鼠單核/巨噬細胞株，在破骨細胞形成因子（RANKL）的存在下可以形成為有骨吸收能力的破骨細胞。?

將紅花提取物溶于α-MEM培養(yǎng)液中，配制成一定濃度，然后加入到RAW264.7細胞的破骨細胞形成體系中，在5%二氧化碳和37℃的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，得到的破骨細胞用TRAP染色發(fā)染色，并在顯微鏡下統(tǒng)計具有3個以上細胞核的TRAP陽性破骨細胞，結果見表1.?