[發明專利]食用油中甾醇的電噴霧離子化-四極桿-飛行時間串聯質譜分析方法

有效

• 申請號: 201210461660.0
• 申請日: 2012-11-15
• 公開（公告）號: CN102967647A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發明（設計）人: 郭寅龍;汪航;張立;張菁;王昊陽;賀小雙;陸森森
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海有機化學研究所
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司 31213
• 代理人: 鄔震中

1.一種食用油樣品分析方法，其特征是所述的油樣品經前處理分成兩等份，分別與吡啶和氘代吡啶進行衍生化反應，再經電噴霧離子化-四極桿-飛行時間串聯質譜儀進行分析食用油中的甾醇類化合物。

2.如權利要求1所述的方法，其特征是所述的食用油樣品是橄欖油、色拉油、芥花油、山茶油、油菜籽油、棉籽油、玉米油或葵花籽油。

3.如權利要求1所述的方法，其特征是通過下述步驟（1）~（4）進行：

（1）將經過前處理的食用油分成兩等份，分別加入乙醚提取兩次，合并有機層后，加入氫氧化鉀干燥，氮氣吹干；

（2）將（1）獲得的第一份樣品20-50μL加入50-100μL?10-40%的吡啶二氯甲烷溶液，再與50-100μL10-40%的三氟甲磺酸酐二氯甲烷混合反應5-20分鐘；（1）獲得的第二份樣品20-50μL加入50-100μL10-40%的氘代吡啶二氯甲烷溶液，再與50-100μL?10-40%的三氟甲磺酸酐二氯甲烷混合反應5-20分鐘；反應物與吡啶的比率范圍10-1000。

（3）步驟（2）獲得的兩份反應液混合后加入甲醇稀釋至1-2mL，進樣0.5-5μL四極桿-飛行時間串聯質譜分析；通過對比電噴霧離子化-四極桿-飛行時間串聯質譜分析結果，獲得食用油中甾醇類化合物的定性結果；

（4）食用油樣品按照（1）的步驟與吡啶反應獲得的反應液，相同體積V_標液的甾醇標準溶液以（1）步驟與氘代吡啶反應獲得的反應液，兩份反應液混合，進行電噴霧離子化-四極桿-飛行時間串聯質譜ESI-Q-TOF分析，樣品中目標化合物的含量通過以下公式比較d₀/d₅峰對的峰強度和標準物含量計算得到定量：C_樣品為食用油待測物含量，C_標液為標準物含量，V_標液為標準溶液的體積，V_樣品為樣品的體積，I₀為ESI-Q-TOF圖譜中甾醇化合物經吡啶衍生后所得產物的峰強度，I₅為ESI-Q-TOF圖譜中標準物經氘代吡啶衍生化后所得產物的峰強度；所述的ESI-Q-TOF圖譜1為電噴霧離子化-四極桿-飛行時間串聯質譜儀分析所得質譜圖。

4.如權利要求1、2或3所述的方法，其特征是所述的甾醇類化合物是膽固醇、豆甾醇、谷甾醇、膽甾烷醇、脫氫膽固醇、羊毛甾醇或油菜籽固醇。

5.如權利要求1所述的10-40%為體積百分數。

6.如權利要求3所述的分析方法，其特征是通過步驟（3）的電噴霧離子化-四極桿-飛行時間串聯質譜進行一級質譜全掃描分析及產物離子掃描分析，確定目標化合物的元素組成，所得的理論和測定的質荷比誤差小于5ppm。

7.如權利要求1、2或3所述的方法，其特征是所述的食用油樣品前處理如下：（5）將食用油1-2mL分成兩等份，各加入1:1體積的1-2mL氫氧化鉀:乙醇，60-70℃皂化水解1-2h，分別加入2.5-5mL的乙醚提取兩次，有機層再加入水洗，合并有機層后加入KOH干燥，氮氣吹干。

8.如權利要求3的方法，其特征是所述的步驟(4)中甾醇標準溶液是將各種植物甾醇和動物甾醇標準品溶解在油酸溶液中配制而成。

9.如權利要求3的方法，其特征是電噴霧離子化-四極桿-飛行時間串聯質譜儀進行分析的優選條件是：毛細管溫度300-350℃，毛細管電壓4000V，干燥氣8L/min，采集速率1.5spectra/s，掃描范圍350–800m/z，數據采集均在正離子模式下進行。子離子掃描條件：碰撞能10-30eV。之后圖譜解析，進行定性及定量分析。