[發(fā)明專利]治療用途的來自人血漿的內(nèi)-α抑制劑蛋白質(zhì)的制備和組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210460374.2
• 申請日: 2004-11-05
• 公開（公告）號: CN103142650A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: Y.-P.林;D.喬斯克;D.C.希克森
• 申請（專利權(quán)）人: 普羅瑟拉生物公司
• 主分類號: A61K35/14
• 分類號: A61K35/14;A61K38/55;C07K14/745;C07K14/81;A61P7/08;A61P15/06;A61P19/02;A61P29/00;A61P31/00;A61P35/00;A61P35/04
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 郭文潔;權(quán)陸軍

本申請是申請日為2004年11月5日，申請?zhí)枮?00480040150.X的、發(fā)明名稱和本發(fā)明相同的發(fā)明專利申請的分案申請。?

相關(guān)申請?

本申請包含2003年11月8日申請的發(fā)明名稱為“治療用途的來自人血漿的內(nèi)-α抑制劑蛋白質(zhì)的制備和組合物”的臨時(shí)專利申請系列No.60/_______中所公開的相關(guān)主題，該申請的公開內(nèi)容在此以其整體引入作為參考。?

政府支持?

本發(fā)明的一部分由國家健康研究所撥款R01GM053008、R01GM057468和R43GM065667支持。?

發(fā)明背景?

內(nèi)-α抑制劑蛋白質(zhì)(IαIp)家族是一組血漿伴生的絲氨酸蛋白酶抑制劑。該家族的成員由重鏈和輕鏈多肽亞基構(gòu)成，通過糖氨基聚糖共價(jià)連接。輕鏈，也稱為bikunin，擔(dān)負(fù)分子的絲氨酸蛋白酶抑制劑活性。名字“bikunin”反映出存在2個(gè)Kunitz型的蛋白酶抑制結(jié)構(gòu)域。正常的血漿中，發(fā)現(xiàn)大部分bikunin是復(fù)合形式，如內(nèi)-α抑制劑(IαI)，其具有225kDa的分子量，和前-α抑制劑(PαI)，其具有120kDa的分子量。IαI中，bikunin連接2個(gè)多肽重鏈，H1和H2，而，PαI中，只有單個(gè)重鏈(H3)連接bikunin。這些復(fù)合形式中，bikunin保持鈍化直至通過部分蛋白水解降解來釋放，這是作為調(diào)節(jié)活性方式的機(jī)理。從復(fù)合物中分裂后，通過腎小球?yàn)V過作用將激活的bikunin從血漿快速清除，這是通過低分子量和受體介導(dǎo)的吸收來促進(jìn)的過程。US專利No.6,489,128和6,660,482各自涉及診斷癌癥和膿毒癥的用途。還公開了抑制轉(zhuǎn)移和治療膿毒癥的方法，然而，實(shí)質(zhì)上組合物不是純的并具有穩(wěn)定性的問題，即短半衰期的問題。?

盡管在五十年多前引入了抗生素，其的確看到了膿毒癥誘導(dǎo)的死亡率從55％降低至35％，醫(yī)學(xué)沒有從膿毒癥個(gè)體死亡率顯著降低而受益。實(shí)際上，膿毒癥繼續(xù)是重病監(jiān)護(hù)室死亡原因之一和大量的膿毒癥個(gè)體死于隨后的敗血癥性休克和多器官衰竭。膿毒癥是對感染例如細(xì)菌感染的全身性反應(yīng)。其通常是由革蘭氏陰性細(xì)菌的內(nèi)毒素或革蘭氏陽性細(xì)菌的外毒素(其可以引發(fā)內(nèi)毒素樣反應(yīng))引起的。全身性反應(yīng)可以導(dǎo)致敗血癥性休克，其特征在于血壓下降、心血管虛脫和/或多器官衰竭。診斷為敗血癥性休克個(gè)體中的死亡率可以高達(dá)35-45％。已經(jīng)難以使用常規(guī)藥物來快速而可靠地治療膿毒癥。?

膿毒癥和敗血癥性休克與先天免疫和凝血系統(tǒng)的激活相關(guān)。膿毒癥和敗血癥性休克臨床上的特征為全身炎癥、凝血病、低血壓和多器官機(jī)能障礙(J.-L.Vincent等，Annuals?of?Medicine?34(2002)606-613)。幾個(gè)膿毒癥過程中，特定蛋白酶的網(wǎng)激活凝血因子、血纖維蛋白溶解因子和補(bǔ)體因子。這些蛋白酶還可以引發(fā)組織和器官損傷并提高血漿中凝血因子和互補(bǔ)因子的非特異性蛋白水解(J.Wite等，Intensive?CareMedicine?8(1982)215-222；S.J.Weiss，New?England?Journal?ofMedicine?320(1989)365-376)。?

發(fā)明簡述?

本發(fā)明涉及純化人血漿的內(nèi)-α抑制劑蛋白質(zhì)(IαIp)的方法及其用途，用于治療人疾病，如膿毒癥、急性炎癥疾病、嚴(yán)重休克、敗血癥性休克、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥、癌轉(zhuǎn)移、傳染病和早產(chǎn)分娩；或用于降低膿毒癥、急性炎癥疾病、嚴(yán)重休克、敗血癥性休克、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥、癌轉(zhuǎn)移、傳染病和早產(chǎn)分娩相關(guān)的死亡率風(fēng)險(xiǎn)。?

根據(jù)一方面，產(chǎn)生源自血漿的IαIp組合物的方法，其中IαI和PαI以生理比例存在于混合物中，包括從血漿分離含有IαI和PαI的血漿級分，其中IαI和PαI以生理比例存在；和純化血漿級分來獲得IαIp純度為約85％至約100％純的IαIp組合物。?

根據(jù)另一方面，IαIp組合物包括內(nèi)-α抑制劑蛋白質(zhì)(IαI)和前-α蛋白質(zhì)(PαI)的混合物，其中IαI和PαI以生理比例存在于所述混合物中，約85％至約100％純。?

相關(guān)方面中，IαIp組合物包括內(nèi)-α抑制劑蛋白質(zhì)(IαI)和前-α蛋?白質(zhì)(PαI)的混合物，其中IαI和PαI以生理比例存在于所述混合物中并具有高的胰蛋白酶抑制比活性。?

另一相關(guān)方面中，IαIp組合物包括半衰期高于一小時(shí)的IαI和PαI。?