[發明專利]一種間充質干細胞注射液及其制備方法和在制備治療兒童擴張型心肌病藥物中的應用

無效

• 申請號: 201210458315.1
• 申請日: 2012-11-14
• 公開（公告）號: CN102908364A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 魏斯溧;高宏;王麗;胡建霞;張學峰
• 申請（專利權）人: 青島奧克生物開發有限公司
• 主分類號: A61K35/44
• 分類號: A61K35/44;A61K35/50;A61K38/38;A61K9/10;A61P9/04;C12N5/0775
• 代理公司: 青島聯智專利商標事務所有限公司 37101
• 代理人: 楊秉利

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，尤其涉及一種間充質干細胞注射液及其制備方法和在制備治療兒童擴張型心肌病藥物中的應用。

背景技術

擴張型心肌病是一側或雙側心腔擴大并伴有心肌肥厚，心肌收縮期泵血功能障礙，產生充血性心力衰竭。本型的特征為左或右心室或雙側心室擴大，并伴有心肌肥厚。心室收縮功能減退，伴或不伴充血性心力衰竭。病情呈進行性加重，死亡可發生于疾病的任何階段。室性或房性心律失常多見，為首見或主要的表現，并有多種心律失常合并存在而構成比較復雜的心律，可以反復發生。高度房室傳導阻滯、心室顫動、竇房阻滯或暫停可導致阿-斯綜合征，成為致死原因之一，此外，尚可有腦、腎、肺等處的栓塞。目前的藥物治療或心臟移植不能很好的改善患者的病情及死亡率。干細胞技術的發展為此疾病的治療帶來了希望。

兒童擴張型心肌病（dilated?cardiomyopathy,DCM）是一類原因不明的心肌疾病，國內其發病率約為84/10萬人。DCM的病程呈進行性，預后極差，嚴重危害兒童健康，其1年的存活率為60%～90%，5年的存活率為20%～80%。目前，DCM仍無特效治療，基礎藥物包括洋地黃、利尿劑、血管擴張劑、神經內分泌阻滯劑，生長激素、大劑量免疫球蛋白等在內的治療措施雖可改善部分DCM患兒的預后，但仍不能從根本上解決問題。在世界各地所作的心臟移植病例中，DCM病人約占44%；雖然有研究者認為左室減容術可明顯提高左心室功能，但其住院死亡率仍高達10～20%，其2年生存率僅為60%；幾乎50%的有癥狀的兒童心肌病患者需要接受心臟移植或在2年內死亡。因此，創新性探索兒童DCM治療的新方法，對改善兒童DCM的預后具有重要的臨床意義。

目前兒童擴張型心肌病的治療主要解決的是防治心律失常和心功能不全，以及對癥支持治療，不能從根本上治療疾病，患者需服用大量糾正心律失常及維護心臟功能的藥物，日常活動嚴格受限，在此情況下病情仍然容易加重，疲勞、受涼、感染等誘因下很容易發生心力衰竭，危及患者生命。目前的藥物與手術治療并不能很好的避免這些情況的發生，改變患者擴大的心臟，恢復正常心臟結構才是治療擴張型心肌病的根本。

理論上，胚胎干細胞和誘導的多能分化干細胞是兒童心肌病患者細胞性心肌成形術的理想種子細胞；但前者的來源有限，且可能存在倫理學問題；而后者在培養過程中需要添加的誘導物質以及培養液本身對種子細胞以及對心肌細胞的作用尚未明確，因此大大限制了其臨床應用，多限于動物實驗研究。間充質干細胞（Mesenchymal?stem?cells，MSCs）是一類具有自我更新能力的多能分化干細胞，分布在骨髓、臍帶、胎盤和成人的許多其他組織中。可分化為多種細胞，如骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞、肌細胞和肌腱細胞。因此，MSCs被稱為通用捐獻細胞。近年來，應用骨髓間充質干細胞移植修復受損心肌成為國內外研究的熱點；研究證實間充質干細胞可以抑制心肌內的炎癥反應、抑制心肌細胞的凋亡、刺激心肌內血管新生；在DCM動物模型中有明顯的治療效果，在臨床研究中顯示間充質干細胞治療早期可明顯改善成人DCM的心室功能。但骨髓間充質干細胞的來源有限，獲取途徑具有創傷性；且隨年齡的增長，骨髓中有分化潛能的間充質干細胞逐漸減少；另外，誘導后的骨髓間充質干細胞轉化為心肌樣細胞的效率較低。對兒童來說抽取骨髓極不方便，兒童本人和家長接受度不高，同時小兒骨髓的抽取量較少。

后來研究者相繼發現臍帶組織和胎盤中含有豐富的間充質干細胞，且經誘導后可分化為神經細胞、成骨細胞、脂肪細胞以及心肌細胞等。Yoo等比較了來源于成人骨髓、睪丸組織和臍帶組織的MSCs的免疫調節作用，發現它們的免疫抑制作用和分泌因子基本一致，認為來源于臍帶組織的間充質干細胞可作為骨髓來源的MSCs的替代者用于同種異體干細胞治療。臍帶MSCs具有低免疫原性和獨特的免疫調節作用，能調節體內過激或較弱的免疫反應，減少自身異常免疫反應對自身組織而破壞。胎盤、臍帶來源的MSCs具有分化潛力大、增殖能力強、免疫原性低、取材方便、無道德倫理問題的限制、易于工業化制備等特征，使其有可能成為用于組織修復、免疫紊亂的調節和代謝性疾病細胞治療最具臨床應用前景的多能干細胞。