[發明專利]生物功能性蛋白大分子的兩親嵌段共聚物膠束及其制備和應用

有效

• 申請號: 201210455274.0
• 申請日: 2012-11-13
• 公開（公告）號: CN103120644A
• 公開（公告）日: 2013-05-29
• 發明（設計）人: 史亞楠;李又欣;孫考祥;劉萬卉;王濤;魯越
• 申請（專利權）人: 山東綠葉制藥有限公司;南京綠葉思科藥業有限公司
• 主分類號: A61K9/10
• 分類號: A61K9/10;A61K9/19;A61K47/32;A61K47/34;A61K38/18;A61K38/21;A61K38/19;A61K39/395
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技術領域

本發明涉及含有治療作用的生物功能性蛋白大分子的兩親嵌段共聚物膠束及其制備方法以及該膠束在藥物制劑中的應用。

背景技術

蛋白藥物是生物技術藥物中很重要的一類，一般通過靜脈和皮下注射給藥。經靜脈和皮下注射后常伴有蛋白質降解，導致活性降低，生物利用度低，要達到需要的血藥濃度和治療效果需要反復給藥，不僅給患者帶來不便，且易產生耐受性，耐藥性及免疫原性等不良反應，因此臨床上需要研制長效的蛋白藥物制劑。目前延長蛋白藥物半衰期的方法主要基于三種原理：1、增大蛋白藥物的分子量，減少腎小球濾過率；2、用游離型藥物和結合型藥物在血漿內形成平衡的特性，緩慢釋放游離型蛋白藥物，使結合型藥物和游離型物的平衡向游離型藥物方向移動；3、減少異源蛋白免疫原性，從而減少其體內清除率。方法主要有：構建突變體，PEG化修飾，血清白蛋白融合，但制備過程比較復雜，成本較高。

近幾年，聚合物膠束以其制備簡單，增加溶解及靶向作用等優點被越來越多的研發機構所關注。膠束粒徑一般小于100nm,可以避免體內網狀內皮組織(RES)的非選擇性截留，從而實現藥物的靶向供給,?而且避免快速的腎臟消除。

帶正電的膠束很容易和血液中白蛋白發生吸附作用，帶負電的有被血小板表面附著的傾向，而且電勢絕對值越大，越容易吸附。膠束接近中性的表面可以減少膠束和這些成分吸附，提高在血液中穩定性。

聚合物膠束由疏水內核和親水外壁組成，具有很多優點，如制備方法簡單，增加溶解及靶向作用等。PEG，PEO是常用的親水外壁，在膠束內核和水相外界中提供一個穩定的界面；PLA生物可降解性和生物相容性良好；目前PEG-PLA，PEG-PCL，PEO-PLA等嵌段聚合物膠束主要用于解決疏水性藥物的溶解性，其中Sanyang公司Genexol?PM在韓國已經上市，多柔比星與PEG-P(Asp)形成的聚合物膠束NK911在日本已經進入Phase?II。但用于蛋白藥物包封的報道特別是用于生物功能性蛋白大分子，目前還沒有。

發明內容

本申請人經過深入研究，提供了一種含有治療作用的生物功能性蛋白大分子的兩親嵌段共聚物膠束，所述聚合物膠束是指合成的兩親性嵌段共聚物在水相中自主裝形成的一種熱力學穩定的膠體溶液；所述有治療作用的生物功能性蛋白大分子是指執行一些在體內的生物學功能，且分子量大于15K道爾頓的具有生物活性的蛋白質。膠束提高有治療作用的生物功能性蛋白大分子生物利用度，延長其半衰期。?

同時提供一種膠束的制備方法，包括將兩親性聚合物與有治療作用的生物功能性蛋白大分子溶液注入到pH值為有治療作用的生物功能性蛋白大分子等電點±2.0的緩沖溶劑，成功的將有治療作用的生物功能性蛋白大分子（促紅細胞生成素，干擾素，抗體等）包入嵌段聚合物形成膠束。

膠束含有治療作用的生物功能性蛋白大分子和兩親嵌段共聚物，所述兩親嵌段共聚物為兩親性的人工合成聚合物及其衍生物，優選在生物功能性蛋白大分子中加入賴氨酸，更優選加入賴氨酸的量與生物功能性蛋白大分子的質量比至少大于1:1。

所述兩親嵌段共聚物親水嵌段為聚乙二醇類、聚丙烯酸類、聚氧乙烯類、聚乙烯醇類，疏水嵌段為內酯類共聚物或均聚物；優選親水嵌段是聚乙二醇，疏水嵌段是聚乳酸(PLA)或乳酸和乙醇酸的共聚物(PLGA)；?所述兩親嵌段共聚物，親水嵌段具有500-30,000的重均分子量，疏水嵌段具有500-50,000的重均分子量；優選親水嵌段重均分子量是4000-20,000，疏水嵌段重均分子量是5000-20,000。

所述治療作用的生物功能的蛋白大分子為促紅細胞生成素（EPO），干擾素，粒細胞集落刺激因子（GM-CSF）,?曲妥珠單抗。

生物功能的蛋白大分子的等電點為促紅細胞生成素（EPO）3.7-4.1?；干擾素?5.7-6.2；細胞集落刺激因子?5.8-6.6；曲妥珠單抗8.5-9.2。

膠束中有治療作用的生物功能性蛋白大分子與兩親嵌段共聚物的質量比為1:50~500，優選質量比為1:50~200。