[發明專利]一種大白菜eIF(iso)4E.c位點轉座子插入突變體有效
| 申請號： | 201210455271.7 | 申請日： | 2012-11-13 |
| 公開（公告）號： | CN102994497A | 公開（公告）日： | 2013-03-27 |
| 發明（設計）人： | 劉栓桃;趙智中;張志剛;李巧云;盧金東 | 申請（專利權）人： | 山東省農業科學院蔬菜研究所 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12Q1/68;A01H1/04 |
| 代理公司： | 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 | 代理人： | 彭成 |
| 地址： | 250100 山東*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 大白菜 eif iso 位點轉 座子 插入 突變體 | ||
1.一種大白菜eIF(iso)4E.c位點轉座子插入突變體，其特征在于：與野生型位點檢測相關的標記命名為ASM-4E.c-W，片段大小1216bp，如SEQ?ID?No.1所示；對應的突變位點檢測相關的標記命名為ASM-4e.c-I，片段大小4419bp，如SEQ?ID?No.2所示。
2.權利要求1所述的大白菜eIF(iso)4E.c位點轉座子插入突變體的引物，其特征在于：引物序列如下：
正向引物PF1：5'-CGAAGAAGAATATGGCGA-3'；
反向引物PR1：5'–AAAAAACCGCTCAAACAAT-3'；如SEQ?ID?NO.3、4所示。
3.權利要求1所述的大白菜eIF(iso)4E.c位點轉座子插入突變體作為特異性分子標記在鑒別大白菜eIF(iso)4E.c位點的基因型中的應用。
4.權利要求2所述的引物在鑒別大白菜eIF(iso)4E.c位點的基因型中的應用。
5.根據權利要求3或4所述的應用，其特征在于：具體應用方式為：利用引物對待測個體的基因組DNA進行PCR擴增，檢測擴增片段大小，如果擴增出1216bp的條帶，則為野生型；擴出4419bp的條帶則為突變型；如果同時擴出兩條帶，則為雜合型。
6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于：所述PCR擴增具體為：在20μl反應體系中，包含1×LA?taq?buffer；20ng的基因組DNA；0.4μM正反向引物；0.25mM?dNTPmix；1個單位的LAtaq；
PCR循環條件：95℃預變性5分鐘；接著是95℃變性30秒，57.5℃退火30秒，72℃延伸5分鐘，35-38個循環，最后72℃延伸10分鐘。
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