[發明專利]家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法有效
| 申請號： | 201210452817.3 | 申請日： | 2012-11-13 |
| 公開（公告）號： | CN102977184A | 公開（公告）日： | 2013-03-20 |
| 發明（設計）人： | 張耀洲;王鑒;杜瑤瑤;陳劍清;舒特俊 | 申請（專利權）人： | 天津耀宇生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C07K1/36 | 分類號： | C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30 |
| 代理公司： | 北京匯澤知識產權代理有限公司 11228 | 代理人： | 黃挺 |
| 地址： | 300457 天津市濱海新區經濟技術開發區*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 家蠶 蠶蛹 30 kd 蛋白 純化 方法 | ||
1.一種家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法，其特征在于，純化步驟為：取家蠶蠶蛹進行破碎細胞，細胞破碎液離心后取上清進行硫酸銨分級沉淀，沉淀重懸后經過80kD~100kD超濾膜超濾，流出液再經過30kD~50kD超濾膜超濾，收集截留液，最終獲得30kD蛋白群。
2.根據權利要求1所述的家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法，其特征在于，純化在0~4℃的溫度條件下進行。
3.根據權利要求1所述的家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法，其特征在于，所述破碎細胞使用勻漿的方法，用PBS與家蠶蠶蛹混合勻漿。
4.根據權利要求1所述的家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法，其特征在于，所述離心的速率為8000rpm以上。
5.根據權利要求1所述的家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法，其特征在于，所述硫酸銨分級沉淀的步驟之前還包括將細胞破碎液離心后的上清用9層紗布過濾的步驟。
6.根據權利要求1所述的家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法，其特征在于，所述硫酸銨分級沉淀是用飽和度為25%的(NH4)2SO4鹽溶，用飽和度為65%的(NH4)2SO4鹽析。
7.根據權利要求1所述的家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法，其特征在于，沉淀重懸后經過100kD超濾膜超濾，流出液再經過30kD超濾膜超濾。
8.根據權利要求1所述的家蠶蠶蛹中30kD蛋白群的純化方法，其特征在于，所述收集截留液是使用截留液體積3~10倍的PBS反復沖洗超濾系統，收集洗出液。
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