[發明專利]以β-環糊精為鍵合固定相的毛細管電色譜柱的制備方法及在手性藥物分離中的應用

無效

• 申請號: 201210452390.7
• 申請日: 2012-11-13
• 公開（公告）號: CN102921193A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 周婕;張振中;劉倩;鄭旭霞;葉凡
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: B01D15/22
• 分類號: B01D15/22;B01J20/26;C07B57/00;C07C209/88;C07C211/42;C07C213/10;C07C215/68;C08G83/00;C08B37/16
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 王逢伍

技術領域

本發明涉及分離技術，特別是一種以β-環糊精為鍵合固定相的毛細管電色譜柱的制備方法及在手性藥物分離中的應用。

背景技術

毛細管電色譜目前是一種較新的分離技術，它主要是基于色譜分離機制進行的。在毛細管中填充、涂敷或鍵合固定相，使被分離組分在固定相中進行保留和分配。由于毛細管電色譜是基于液相色譜和毛細管電泳技術相結合的一種分離技術，所以它具有良好的選擇性和較高的分離效率。根據固定相不同的填充方法，毛細管電色譜可以分為3個亞型，即毛細管開管柱（OTC-CEC），毛細管填充柱（PC-CEC）和毛細管整體柱（MC-CEC）。

填充毛細管電色譜是把固定相填充到毛細管中的一種電色譜技術，它是毛細管電色譜最常用的一種技術，因為它有分離效率高，固定相資源豐富等優點，所以應用范圍較廣。

環糊精(CD)是一類研究很多的超分子化合物，由于環糊精中的各個葡萄糖基都不能繞糖苷鍵自由旋轉，因此環糊精的形狀呈錐體圓桶形。圓筒的內側是以糖苷氧原子連結C-H組成的環，呈現相對的疏水性，可以接受不同類型的客體化合物，尤其是那些非極性基團。環糊精空穴的外環為一級和二級羥基，使得環糊精外部呈親水性。CD有多個手性中心，其促使對映體分離的基本原理是在它們之間形成包合物，而不同包合物的穩定常數不同，從而實現分離。由于環糊精類手性選擇劑擁有很多手性中心、每個葡萄糖單元都是固定的椅式結構，使得環糊精具有很多結合部位，如β-環糊精有35個不同的結合部位，這種結構使得環糊精比相同的葡萄糖結構和數量的線性多糖擁有多得多的手性識別能力，可以分離更多的對映體。

在?α-CD、β-CD、γ-CD?這?3?種天然?CD?中，α-CD?因空腔較小，γ-CD?因難于制備，價格昂貴，使其應用受到了一定的限制，而?β-CD?制備相對較容易，價格低廉；無毒，無環境污染；其空腔能與大部分客體體積相匹配得到使其得到了廣泛應用，因此，本發明的研制成功具有統計學上的意義。

發明內容

針對上述情況，為解決現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種以β-環糊精為鍵合固定相的毛細管電色譜柱的制備方法及在手性藥物分離中的應用，可有效解決毛細管電色譜柱的制備及手性藥物分離的問題。

本發明解決的技術方案是，以β-環糊精為起始反應物，采用分步合成法，依次合成六位單取代的對甲苯磺酰-β-環糊精、六位單取代的氨化-β-環糊精、硅烷化硅膠以及β-環糊精鍵合硅膠手性固定相，將β-環糊精鍵合硅膠手性固定相裝填至毛細管柱中，制備成毛細管填充柱，其步驟包括有：①.六位單取代的對甲苯磺酰-β-環糊精的制備，②.六位單取代的氨化-β-環糊精的制備，③.硅烷化硅膠的制備，④.β-環糊精鍵合硅膠手性固定相的制備，⑤.毛細管填充柱的制備。

本發明β-環糊精鍵合硅膠固定相的制備相對較容易，價格低廉，低毒，環境污染低，此外，采用分步合成法能有效的控制產物的結構和純度，β-CD的空腔與大部分客體體積相匹配，是β-環糊精為鍵合固定相的毛細管電色譜柱的制備方法及在手性分離中的應用上的創新。

附圖說明

圖1為本發明鹽酸舍曲林在CEC模式下的拆分色譜圖。

圖2為本發明鹽酸克倫特羅在CEC模式下的拆分色譜圖。

具體實施方式

以下對本發明的具體實施方式作進一步詳細說明。

本發明的具體制備過程如下：

①.六位單取代的對甲苯磺酰-β-環糊精（β-CD-6-OTs）的制備：

????a.?β-環糊精重結晶，室溫18-25?℃下，β-環糊精(?β-CD?)在水中的溶解度為18.8?mg/g，在80℃為196.6?mg/g，β-環糊精與純水按質量比1:5進行重結晶，在500ml燒杯中加入200?ml蒸餾水，加熱至微沸，稱取40gβ-環糊精，攪拌加入至溶解，趁熱快速抽濾，濾液于冰箱中放置12h，β-環糊精結晶析出，抽濾，得重結晶后的β-環糊精，按上述步驟將β-環糊精重結晶3次，將所得經3次重結晶的β-環糊精置于真空干燥箱中80℃干燥12h，備用；

????b.?對甲苯磺酰氯重結晶及其乙腈溶液的制備，稱取對甲苯磺酰氯10g，加入30?ml石油醚，置于加熱套中加熱至60～90℃使之溶解，放置室溫18-25℃，并于4?℃冷藏12?h，抽濾，得重結晶的對甲苯磺酰氯，按上述步驟重結晶3次，再置真空干燥箱中25?℃干燥4h，得3次重結晶的對甲苯磺酰氯，稱取5.04g?3次重結晶的對甲苯磺酰氯溶于15ml乙腈中，成對甲苯磺酰氯乙腈溶液，備用；