[發明專利]一種高純度達托霉素的制備方法

有效

• 申請號: 201210447657.3
• 申請日: 2012-11-12
• 公開（公告）號: CN102924572A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 段寶玲;張雪霞;任風芝;李曉露;朱秀良;李寧;陳書紅;成曉迅;林毅;王海燕;李麗紅;張艷立;董愛華
• 申請（專利權）人: 華北制藥集團新藥研究開發有限責任公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/16;C07K1/14
• 代理公司: 石家莊眾志華清知識產權事務所(特殊普通合伙) 13123
• 代理人: 張明月

1.一種高純度達托霉素的制備方法，包括對達托霉素發酵液的濾液進行粗提的步驟、精提的過程，其特征在于：所述粗提是將達托霉素發酵液的濾液導入大孔吸附樹脂進行吸附，用解吸劑對大孔吸附樹脂進行梯度解吸，然后對解吸液進行減壓濃縮、結晶、干燥，得到達托霉素粗品；所述精提是將達托霉素粗品用極性溶劑溶解，然后將所得的溶解液注入聚合物納米微球柱進行層析分離，再用洗脫劑對聚合物納米微球柱進行梯度洗脫，并收集HPLC含量大于等于98.5%的洗脫液，再將此洗脫液減壓濃縮、結晶、干燥，得到HPLC含量大于等于98.5%的達托霉素。

2.根據權利要求1所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述達托霉素發酵液的濾液的制備是向達托霉素發酵液中加入助濾劑，經攪拌混合后對達托霉素發酵液進行過濾，而制得達托霉素發酵液的濾液。

3.根據權利要求2所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述助濾劑的用量為每100L達托霉素發酵液中加入0.5kg?~?5kg助濾劑。

4.根據權利要求2或3任一項所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述助濾劑為珍珠巖或硅藻土的其中一種或者其混合物。

5.根據權利要求1所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述大孔吸附樹脂為LX-50、D113或D312樹脂的其中一種。

6.根據權利要求5所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述對大孔吸附樹脂進行梯度解吸的解吸劑的體積百分濃度分別為30%～40%和70%～75%。

7.根據權利要求1所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述聚合物納米微球為UNIPS30RPC。

8.根據權利要求7所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述對聚合物納米微球進行梯度洗脫的洗脫劑的體積百分濃度分別為30%～40%和55%～60%；所述極性溶劑為70%體積百分濃度的甲醇或者乙醇水溶液。

9.根據權利要求5～8任一項所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述解吸劑或洗脫劑為乙醇水溶液或甲醇水溶液。

10.?根據權利要求1所述的高純度達托霉素的制備方法，其特征在于：所述粗提和精提步驟中對解吸液或者洗脫液的濃縮是將解吸液或者洗脫液中達托霉素的濃度濃縮為100～120g/L；所述結晶是向濃縮液中加入6～8倍量的丙酮或者異丙醇進行重結晶，結晶后所得的結晶粉在40℃～50℃條件下真空干燥24h。