[發明專利]一種合浦珠母貝數量性狀基因聚合育種方法

有效

• 申請號: 201210446425.6
• 申請日: 2012-11-09
• 公開（公告）號: CN102960272A
• 公開（公告）日: 2013-03-13
• 發明（設計）人: 喻達輝;黃桂菊;劉寶鎖;范嗣剛;羅會;黎火金
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院南海水產研究所
• 主分類號: A01K61/00
• 分類號: A01K61/00
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 張海文

技術領域

本發明屬于水產育種領域，具體涉及一種合浦珠母貝數量性狀基因聚合育種方法。

背景技術

合浦珠母貝（Pinctada?fucata）是重要的海水養殖貝類和生產珍珠的主要母貝，文明遐邇的合浦珍珠，即“南珠”就是該貝所產。合浦珠母貝主要生活在熱帶和亞熱帶海區。我國合浦珠母貝養殖珍珠的研究生產始于二十世紀中期，1958年人工育珠成功，1965年人工育苗成功，標志著合浦珠母貝進入全人工養殖時代，即利用人工繁殖的種苗進行養殖，養成后挑選成熟個體又開展人工繁殖，形成封閉循環體系。經過40多年的人工養殖后，由于缺乏科學、系統的育種方法，出現了個體小型化、養殖性能下降、死亡率高和珍珠質量差等問題，因此培育生產性能優良的合浦珠母貝新品種十分緊迫。

我國優良品種的培育工作從1974年開始，由南海水產研究所與海康縣流沙珍珠場合作，利用合浦珠母貝（母本）與大珠母貝（父本）進行雜交，意在培育出個體大，生長快，成活率高，抗病力強，并適合于插大核的新品種。姜衛國等（1983）也曾進行過合浦珠母貝、長耳珠母貝(Pinctada?chemnitzi)?和大珠母貝(Pinctada?maxima)種間雜交試驗并培育出了F2，但對后代染色體、同工酶譜和性狀的研究表明雜交后代并不是真正的雜種。之后，姜衛國等于1987年起開始馬氏珠母貝多倍體育種工作。在“九五”863重大項目的支持下，珠母貝三倍體種苗生產和育珠已達到中試水平，用珠母貝三倍體育珠，成珠率提高25%，大珠和中珠比例明顯提高，珍珠平均重量提高14.3%，顯示出良好的育珠性狀。但三倍體在制種上工序繁瑣且誘導率不穩定，限制了其在生產上的大規模應用。

“十五”和“十一五”期間我國開展了合浦珠母貝選擇育種研究，分別利用印度合浦珠母貝和日本合浦珠母貝與三亞合浦珠母貝和大亞灣合浦珠母貝雜交，構建了地理雜交群體品系，一些單位也構建了家系。其中本申請人報道了利用廣東、廣西和海南合浦珠母貝構建雙列雜交家系的遺傳分析結果，但在雙列雜交家系的基礎上采用數量性狀基因聚合育種技術開展遺傳選育、培育優良品種的研究尚未見報道。

發明內容

本發明的目的是為了提供一種改良合浦珠母貝數量性狀、培育新品種的方法。該方法是在雙列雜交家系的基礎上通過優-優結合實現優良數量性狀基因快速聚合的一種育種技術，主要步驟如下：

（1）基礎家系構建：收集至少3個不同來源的合浦珠母貝群體，構建F1代雙列雜交家系，每個組合至少10個家系，每個家系的育苗與養殖的條件相同；

（2）家系評價與選留：養殖1周年或每代在相同養殖周期時對每個家系進行評價，每個家系隨機測量500個以上個體，計算平均育種值，然后按照育種值進行家系排序，選留育種值排前的至少30個家系作為構建第二代家系的候選家系；

（3）個體評價與親本的選擇：在候選家系中篩選雌雄個體，選擇大小排前100的雌雄個體進行測量、計算個體育種值，排序；

（4）第二代家系的構建：分別從雌雄育種值最大的家系中選擇個體育種值最大的雌雄個體交配，從雌雄育種值排第二的家系中選擇個體育種值排第一的雌雄個體交配，以此類推，進行強強結合，同時避免家系內交配和近交系數超過閾值的個體間交配，構建F2代核心育種家系；

（5）重復步驟（1）～（4）構建F3、F4、F5等多代家系進行累代選育至5代以上。此時，一般不再淘汰家系，確需淘汰的需及時補充新的家系，使家系數量保持在30個以上。

步驟（1）是按雌雄1：1比例構建F1代雙列雜交家系。

步驟（2）的具體操作為：在養殖1周年或每代在相同養殖周期時進行家系評價，每個家系隨機取樣測量500個以上，測量性狀指標包括殼長、殼高、殼寬和體重等，然后利用ASReml軟件基于BLUP的線性混合模型計算每個家系的育種值，然后按照育種值進行家系排序，并按大小編號，根據基礎家系的數量確定選留家系數量，可選留50%或60%，使選留家系保持在30個以上。

步驟（3）的具體操作為：繁殖季節前，在雌雄容易分辨的情況下對選留家系按雌雄分別挑選最大的100個個體進行性狀測量、個體育種值計算與排序；在雌雄難以準確分辨的情況下則統一挑選最大的100個個體進行測量、家系育種值計算和排序；在性別已知情況下，每個家系內育種值最大的雌雄個體則為候選親本，同一性別候選親本在家系間進行排序；在性別未知情況下則按個體育種值大小排序，1號為候選親本，確定性別后，后續編號第一個出現相反性別的則為另一性別的候選親本。