[發(fā)明專(zhuān)利]一種聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑及其制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210444286.3
• 申請(qǐng)日: 2012-11-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102942918A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-02-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王飛;趙江;楊京法
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院化學(xué)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C09K11/06
• 分類(lèi)號(hào): C09K11/06;C08F220/38;C08F220/60;C08F220/36;C08F2/38
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.式Ⅰ所示聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑，

式Ⅰ

式Ⅰ中，R₁為氫或甲基；R₂為羧基或磺酸基；R₃為氫或甲基；FR為有機(jī)共軛熒光基團(tuán)；X為O或NH，Y為O或NH；m為1~3之間的自然數(shù)，n為1~6之間的自然數(shù)，p為2~4之間的自然數(shù)；q₂為0.1~10之間的數(shù)，且q₁+q₂為50~2000之間的數(shù)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑，其特征在于：m為2，n為1~3之間的自然數(shù)，p為2；q₂為0.5~0.7之間的數(shù)，且q₁+q₂為150~1121之間的數(shù)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑，其特征在于：所述FR的結(jié)構(gòu)式如式Ⅱ所示，

式Ⅱ

式Ⅱ中，R₄為氫、甲基或乙基；R₅為氫或甲基；R₆為NH₂、NH(CH₂CH₃)、N(CH₂CH₃)₂或OH。

4.式Ⅰ所示聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑的制備方法，包括如下步驟：

（1）將式Ⅲ所示甜菜堿單體溶于緩沖溶液中，其中所述緩沖溶液的pH值為6.0～8.0；

式Ⅲ

式Ⅲ中，R₁、R₂、X、m和n的定義同式Ⅰ；

（2）在惰性氣氛下，向步驟（1）得到的溶液中加入引發(fā)劑、鏈轉(zhuǎn)移劑、式Ⅳ所示熒光共聚單體和無(wú)機(jī)鹽，經(jīng)聚合反應(yīng)即得式Ⅰ所示聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑；

式Ⅳ

式Ⅳ中，R₃、Y、P和FR的定義同式Ⅰ。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于：步驟（1）得到的溶液中，式Ⅲ所示甜菜堿單體的摩爾濃度為0.3~1.0mol?L^-1；所述緩沖溶液為磷酸鹽類(lèi)緩沖溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的制備方法，其特征在于：步驟（2）中，所述引發(fā)劑為偶氮類(lèi)化合物或無(wú)機(jī)過(guò)氧化合物；

所述偶氮類(lèi)化合物為含羧基的偶氮類(lèi)化合物；

所述機(jī)過(guò)氧化合物為過(guò)硫酸鉀-硫代硫酸鈉或過(guò)硫酸鉀-亞硫酸鈉；

所述鏈轉(zhuǎn)移劑為雙硫酯或三硫酯；

所述無(wú)機(jī)鹽為NaBr、NaCl、KCl和/或KBr。

7.根據(jù)權(quán)利要求4-6中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于：步驟（2）中，所述聚合反應(yīng)的溫度為60~70℃，時(shí)間為5~30小時(shí)；

式Ⅲ所示甜菜堿單體與式Ⅳ所示熒光共聚單體的摩爾比為（50～5000）：1，式Ⅲ所示甜菜堿單體與所述鏈轉(zhuǎn)移劑的摩爾比為（50～2000）：1，所述鏈轉(zhuǎn)移劑與所述引發(fā)劑的摩爾份數(shù)比為（5～20）：1。

8.根據(jù)權(quán)利要求4-7中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于：步驟（2）之后，所述方法還包括后處理步驟；

所述后處理步驟為：將所述聚合反應(yīng)完畢后的體系加入至有機(jī)溶劑中，得沉淀物，經(jīng)分離、干燥即得所述聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑；所述有機(jī)溶劑的體積用量為所述聚合反應(yīng)體系的7~10倍。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于：所述方法還包括對(duì)所述聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑進(jìn)行透析的步驟；

所述透析步驟為：將所述聚甜菜堿熒光標(biāo)記劑溶解與NaBr水溶液中，然后加入至透析袋中，再置于去離子水中于15℃～50℃的條件下進(jìn)行透析，然后經(jīng)冷凍干燥即得。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征在于：所述透析袋的截留分子量為3.5kDa～14kDa；所述NaBr水溶液的濃度為0.05~0.1mol?L^-1；所述透析的時(shí)間為2~4天。