[發明專利]一種金線蓮的組培繁殖方法

有效

• 申請號: 201210442593.8
• 申請日: 2012-11-07
• 公開（公告）號: CN102907327A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 方金鎮;鄭志紅;方加強
• 申請（專利權）人: 廈門加晟生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所 35200
• 代理人: 馬應森

1.一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于包括以下步驟：

1）取金線蓮的莖段作為外植體材料，將外植體消毒；

2）莖段不定芽的誘導；

3）組培苗的培育；

4）組培苗移栽。

2.如權利要求1所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于在步驟1）中，所述金線蓮選用野生金線蓮。

3.如權利要求1所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于在步驟1）中，所述外植體為除去金線蓮葉片后的野生金線蓮莖段。

4.如權利要求1所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于在步驟1）中，所述外植體消毒的具體方法為：

（1）將外植體置于流動水中沖洗；

（2）對沖洗后的外植體浸潤滅菌；

（3）將步驟（2）浸潤滅菌后的外植體放入HgCl溶液滅菌；

（4）將步驟（3）處理后的外植體用無菌水進行涮洗。

5.如權利要求4所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于在步驟（1）中，所述沖洗的時間為1～3h；在步驟（2）中，所述滅菌在水平超凈工作臺內完成，外植體放置于已消毒的容器中并用酒精浸泡，所述浸泡的時間為10～30s；在步驟（3）中，所述HgCl溶液的質量分數為0.1%，所述滅菌的時間為5～20min；在步驟（4）中，所述涮洗的條件為涮洗5～10次，每次涮洗的時間為1～5min。

6.如權利要求1所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于在步驟2）中，所述莖段不定芽的誘導方法為：將已消毒的外植體莖段切成3段，分別接種于MS培養基上，莖段不定芽誘導后，轉接到增殖培養基，培養后得到組培苗。

7.如權利要求6所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于所述切成3段是切成上段、中段和下段，所述上段切除莖尖，所述上段、中段和下段的長度可分別為0.5～1.0cm，所述上段、中段和下段最好每段均帶有1～2個節間；所述培養的時間可為2～4個月。

8.如權利要求6所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于所述增殖培養基的組分為：MS培養基+細胞分裂素（6-芐氨基腺嘌呤,6-BA）0.1～0.5mg/L+激動素（6-糖基氨基嘌呤,KT）0.1～0.5mg/L+生長素（a-萘乙酸,NAA）0.1～0.5mg/L+吲哚丁酸(IBA)0.1～0.5mg/L+水解酪蛋白(CH)0.3～0.5g/L+香蕉50～80g/L+活性碳0.5～1.5g/L+蔗糖25～40g/L+瓊脂6.5～8g/L；增殖培養基的pH可為：5.8～6。

9.如權利要求1所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于在步驟3）中，所述組培苗的培育方法為：將組培苗接種于生根培養基上，經過培育得到生根組培金線蓮苗，培育的環境條件為：溫度24±2℃，光照時間11h/d，光照強度900～2000lux，培育時間為2～3個月；所述生根培養基的組分為：1/2MS培養基+細胞分裂素（6-芐氨基腺嘌呤,6-BA）0.1～0.5mg/L+激動素（6-糖基氨基嘌呤,KT）0.1～0.5mg/L+生長素（a-萘乙酸,NAA）0.1～0.5mg/L+水解酪蛋白(CH)0.3～0.5g/L+香蕉100～120g/L+活性碳1～1.5g/L+蔗糖15～30g/L+瓊脂6.5～8g/L；生根培養基的pH可為：5.8～6。

10.如權利要求1所述的一種金線蓮的組培繁殖方法，其特征在于在步驟4）中，所述組培苗移栽方法為：將生根組培金線蓮苗移栽大棚，大棚的基質按質量比的原料組成為：泥炭土∶菜園土∶蛭石=2∶1∶1。