[發(fā)明專利]一種藍莓錦葵色素的提取方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210440826.0
• 申請日: 2012-11-07
• 公開（公告）號: CN102875515A
• 公開（公告）日: 2013-01-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張麗霞;周劍忠;劉小莉;李瑩;王英;馬艷弘;黃開紅
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學院
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;C09B61/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 肖明芳

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種藍莓錦葵色素的提取方法，屬于食品加工領(lǐng)域。

背景技術(shù)

藍莓錦葵色素（malvidin,Mv）為藍莓特有的一種花青素活性成分，結(jié)構(gòu)式如下所示：

藍莓是杜鵑花科越橘屬(Vaccinium?spp.)多年生落葉或常綠灌木，在我國主要有四大種植區(qū)域：長白山、大小興安嶺產(chǎn)區(qū)，遼東半島、膠東半島產(chǎn)區(qū)，長江流域產(chǎn)區(qū)和華南產(chǎn)區(qū)。藍莓漿果富含花青素、黃酮醇、酚酸等多種活性成分，其中花青素常見有15種，主要為錦葵色素，還有少量的芍藥色素、矮牽牛色素及翠雀色素等。研究表明，藍莓花青素具有防止腦神經(jīng)老化、降血糖、降血壓、降血脂、抗氧化、抗癌和增強機體免疫力等多種生物活性功能。

專利（申請?zhí)朇N201210144875.X，公開號CN102731462A）公開了“一種純化藍莓中花青素的方法”，專利（申請?zhí)朇N201010246735.4，公開號CN101914304A）公開了“一種藍莓花青素的提取方法”，專利（申請?zhí)朇N201110182729.1，公開號CN102285953A）公開了“以HP2MGL大孔樹脂分離純化藍莓花色苷的方法”，均采用大孔樹脂純化藍莓的乙醇粗提液后，進行噴霧干燥或冷凍干燥得到藍莓花青素的混合物產(chǎn)品。錦葵色素作為藍莓主要生物活性成分之一，目前已取得一定的研究進展，但關(guān)于藍莓錦葵色素單體的分離純化方法研究鮮見報道，且在市場上也未見藍莓錦葵色素單體樣品流通。因此，尋找一種提取率高、成本低和易于工業(yè)化生產(chǎn)的藍莓錦葵色素分離純化工藝，可為藍莓花青素的特征生物活性研究奠定基礎(chǔ)，為構(gòu)效關(guān)系的研究提供前提。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種藍莓錦葵色素的提取方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種藍莓錦葵色素的提取方法，它包括如下步驟：

(1)將藍莓的乙醇提取物浸膏溶于蒸餾水中，得到藍莓花青素粗提物水溶液；

(2)將步驟(1)得到的粗提物水溶液過Amberlite-XAD-7型大孔吸附樹脂柱，充分吸附后，先用蒸餾水洗雜，再用乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液濃縮至0.1～0.2倍體積，濃縮液用乙酸乙酯萃取，重復萃取3次，合并水相，將水相減壓濃縮至無水排出，得到花青素提取物浸膏；

(3)將步驟(2)得到的花青素提取物浸膏用乙酸水溶液溶解，過Sephadex?LH-20凝膠柱，用甲醇、蒸餾水和甲酸梯度洗脫，甲醇、蒸餾水、甲酸的三個梯度分別為體積比99∶0∶1、90∶9∶1和80∶19∶1，收集90∶9∶1的洗脫部分，進行濃縮后冷凍干燥，將凍干粉用乙酸水溶液溶解，過Sephadex?LH-20凝膠柱，然后用甲醇、蒸餾水和甲酸線性梯度洗脫，甲醇、蒸餾水和甲酸的體積比由95∶4∶1均勻變化到90∶9∶1，收集洗脫峰，進行濃縮后冷凍干燥即為藍莓錦葵色素樣品。

步驟(1)中，所述的藍莓的乙醇提取物浸膏按如下方法制備得到：將3～5kg藍莓清洗、打漿，加入10倍重量的體積百分濃度為90%乙醇水溶液中，在40℃下浸泡3h，離心，取上清液濃縮后即得。

步驟(1)中，對于1L蒸餾水，藍莓的乙醇提取物浸膏的加入質(zhì)量為300～500g。

步驟(2)中，所述的乙醇水溶液中，乙醇的體積百分濃度為50%。

步驟(2)中，每次萃取，乙酸乙酯的使用體積為濃縮液體積的1.5~5倍。

步驟(3)中，所述的乙酸水溶液的體積百分濃度為0.1%。

步驟(3)中，對于每10g花青素提取物浸膏，乙酸水溶液的加入體積為5~7mL。

步驟(3)中，對于每1g凍干粉，乙酸水溶液的加入體積為10~15mL。

步驟(3)中，階段梯度洗脫過程中，三個梯度分別洗脫30min，線性梯度洗脫過程中，線性均勻變化的時間為30min，甲醇、蒸餾水和甲酸的體積比為90∶9∶1時保持30min。

有益效果：

1、利用藍莓為原料，分離純化得到藍莓特有的花青素物質(zhì)——錦葵色素，對藍莓花青素的構(gòu)效關(guān)系研究意義深遠；

2、將Amberlite-XAD-7大孔樹脂用于藍莓花青素的初步提純，使藍莓花青素的純度大幅度提高；

3、通過凝膠柱層析進行反復分離純化，得到較高純度的藍莓花青素單體樣品——藍莓錦葵色素。

附圖說明

圖1是實施例1所得藍莓錦葵色素的液相色譜圖。其中，保留時間t_R=12.53min為錦葵色素。