[發(fā)明專利]發(fā)酵制備高純度賴氨酸硫酸鹽的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210440083.7
• 申請日: 2012-11-07
• 公開（公告）號: CN102925506A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發(fā)明（設計）人: 馬吉銀;陳崇安;孟剛
• 申請（專利權）人: 寧夏伊品生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12P13/04
• 分類號: C12P13/04;C12P13/08;A23K1/16
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1.發(fā)酵制備含L-賴氨酸硫酸鹽的產(chǎn)品的方法，其包括：

(1)將編碼氨基酸序列如SEQ?ID?No：l所示的蛋白或其變體的多核苷酸導入產(chǎn)L-賴氨酸的菌；

(2)在發(fā)酵條件下液體培養(yǎng)步驟(1)獲得的菌，并收集培養(yǎng)的上清液，所述上清液中包含如下重量配比的氨基酸：

賴氨酸51～55份，優(yōu)選為51.5～53.5份，更優(yōu)選為52.3份；

天冬氨酸1.2～1.8份，優(yōu)選為1.45～1.6份，更優(yōu)選為1.54份；

蘇氨酸0.8～1.1份，優(yōu)選為0.9～1份，更優(yōu)選為0.94份；

絲氨酸0.4～0.65份，優(yōu)選為0.5～0.6份，更優(yōu)選為0.56份；

谷氨酸2～3份，優(yōu)選為2.2～2.6份，更優(yōu)選為2.4份；

甘氨酸0.75～1.1份，優(yōu)選為0.85～1份，更優(yōu)選為0.92份；

丙氨酸1.2～1.6份，優(yōu)選為1.3～1.5份，更優(yōu)選為1.4份；

纈氨酸0.75～1.1份，優(yōu)選為0.85～1份，更優(yōu)選為0.93份；

甲硫氨酸0.3～0.5份，優(yōu)選為0.35～0.48份，更優(yōu)選為0.42份；

異亮氨酸0.45～0.75份，優(yōu)選為0.55～0.65份，更優(yōu)選為0.61份；

亮氨酸1～1.5份，優(yōu)選為1.2～1.35份，更優(yōu)選為1.27份；

酪氨酸0.5～0.8份，優(yōu)選為0.6～0.75份，更優(yōu)選為0.67份；

苯丙氨酸0.5～0.8份，優(yōu)選為0.6～0.7份，更優(yōu)選為0.64份；

組氨酸0.8～1.2份，優(yōu)選為0.9～1.05份，更優(yōu)選為0.97份；和，

精氨酸，0.9～1.3份，優(yōu)選為1～1.2份，更優(yōu)選為1.1份；

(3)取通過步驟(2)制備的上清液，進行純化，得到賴氨酸純度提高的級份，優(yōu)選級份中賴氨酸純度提高至75～95％(w/w)，更優(yōu)選為76～92.6％(w/w)，更加優(yōu)選為78～83％(w/w)，最優(yōu)選為80.7％(w/w)；

(4)另取通過步驟(2)制備的上清液，加入硫酸，并任選進行濃縮，得到酸化的上清液；和

(5)將步驟(3)獲得的級份加入硫酸，并噴入干燥機，在干燥機內(nèi)形成顆粒核心，而后向該干燥機噴入步驟(4)獲得的酸化的上清液，包裹上述顆粒核心，然后干燥至含水率小于3％(w/w)。

2.權利要求1所述的方法，其中純化是層析純化，優(yōu)選是凝膠過濾層析純化，更優(yōu)選是Sephadex?G-10層析純化。

3.權利要求1所述的方法，其中，步驟(3)中所取的通過步驟(2)制備的上清液與步驟(4)中所另取的通過步驟(2)制備的上清液的體積比為0.5～1.5∶2～4，優(yōu)選為0.75～1.25∶2.5～3.5，更優(yōu)選為1∶3。

4.含L-賴氨酸硫酸鹽的顆粒(其優(yōu)選是飼料添加劑顆粒)，其包括顆粒核心和包裹該核心的外層，其中顆粒核心的L-賴氨酸含量為60～72％(w/w)，優(yōu)選為61～70.6％(w/w)，更優(yōu)選為62～65％(w/w)，最優(yōu)選為63.5％(w/w)，外層的L-賴氨酸含量為51～55％(w/w)，優(yōu)選為51.5～53.5％(w/w)，更優(yōu)選為52.3％(w/w)。

5.權利要求4所述的顆粒，其含水率小于5％(w/w)，優(yōu)選小于3％(w/w)，更優(yōu)選小于2.5％(w/w)。

6.權利要求4所述的顆粒，其是由權利要求1～3之任一所述的方法制備的。

7.含L-賴氨酸硫酸鹽的顆粒核心(其優(yōu)選是飼料添加劑顆粒核心)，其中L-賴氨酸含量為60～72％(w/w)，優(yōu)選為61～70.6％(w/w)，更優(yōu)選為62～65％(w/w)，最優(yōu)選為63.5％(w/w)。

8.權利要求7所述的顆粒核心，其是由權利要求1～3之任一所述的方法的步驟(1)、(2)、(3)和(5)制備的。

9.權利要求7或8所述的顆粒核心在制備含水率小于5％(w/w)(優(yōu)選小于3％(w/w)，更優(yōu)選小于2.5％(w/w))的含L-賴氨酸硫酸鹽的飼料添加劑中的應用。

10.權利要求9所述的應用，其中含L-賴氨酸硫酸鹽的飼料添加劑是權利要求4～6之任一所述的顆粒。