[發明專利]一種從鴉膽子中提取純化鴉膽子素D的制備方法

有效

• 申請號: 201210439561.2
• 申請日: 2012-11-07
• 公開（公告）號: CN102924467A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 陳啟建;歐陽明安;譚慶偉
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: C07D493/10
• 分類號: C07D493/10
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種從鴉膽子中提取純化鴉膽子素D的制備方法，包括材料粉碎、95%工業乙醇回流提取、提取液濃縮、提取物去糖、硅膠柱層析、重結晶，其特征在于所述提取物去糖是采用提取液濃縮液的水懸浮液上D101大孔樹脂，先用2-4個柱體積的水洗脫，再用3-5個柱體積的80%乙醇洗脫，收集醇洗脫液后減壓濃縮。

2.根據權利要求1所述一種從鴉膽子中提取純化鴉膽子素D的制備方法，其特征在于所述硅膠柱層析是先用干柱法分離，再用濕柱法分離。

3.根據權利要求2所述一種從鴉膽子中提取純化鴉膽子素D的制備方法，其特征在于所述干柱法分離中樣品與拌樣硅膠的質量比為1：5-10，拌樣硅膠與填柱硅膠的質量比為1：15-20；所述濕柱法分離與通常采用的硅膠柱層析法相同。

4.根據權利要求1所述的一種從鴉膽子中提取純化鴉膽子素D的制備方法，其特征在于：所述制備方法的步驟如下：?

（1）材料粉碎：取新鮮鴉膽子經曬干或置烘干箱中經45℃-55℃烘干后，用植物粉碎機粉碎成粉末；

（2）95%工業乙醇回流提?。喝∫欢康姆勰┯诨亓鳠恐?，按樣品與提取溶劑的質量體積比為1：8-10加入95%的工業乙醇，搖勻，安裝好相應的冷凝裝置，將回流燒瓶置于電熱恒溫水浴鍋中，80℃回流1-2小時，自然冷卻至室溫，過濾，殘渣用同樣方法回流1-2次，合并濾液，即為提取液；

（3）提取液濃縮：將提取液用旋轉蒸發儀減壓濃縮至溶液成粘稠狀，得到濃縮液；

（4）提取物去糖：按體積比為1：5-8于濃縮液中加入蒸餾水，80℃水浴加熱并攪拌使之充分溶解，抽濾，濾液經D101大孔樹脂柱層析吸附，先用2-4個柱體積的水洗脫，再用3-5個柱體積的80%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，減壓濃縮至膏狀，得到膏狀提取物；

（5）硅膠柱層析：先用干柱法分離，用適量甲醇充分溶解膏狀提取物，將所得溶液與硅膠拌勻，提取物與拌樣硅膠的質量比為1：5-10，待甲醇揮干后，將拌樣硅膠加到填好硅膠的干柱上，拌樣硅膠與填柱硅膠的質量比為1：15-20，以氯仿與丙酮體積比為8：5的混合溶劑作為展開劑進行柱層析，當展開劑到達柱底部時結束展開，待層析柱中多余溶劑揮干后，根據鴉膽子素D標準品在硅膠薄層層析中所測的R_f值，推算其在層析柱上的相應位置，以該位置為中心，將柱中硅膠平均分為4-8段，每段約5-10?cm，分別取出各段硅膠并用甲醇充分洗脫，將各洗脫液進行薄層層析檢測，合并含鴉膽子素D的部位，并用常規方法濃縮，得濃縮物A；將干柱法分離得到的濃縮物A再用濕柱法分離，濕柱法分離與通常采用的硅膠柱層析法相同，以氯仿、丙酮、甲醇體積比為10：2：1的混合溶劑為洗脫劑進行洗脫，分部收集洗脫液，將各洗脫液進行薄層層析檢測，合并僅在與鴉膽子素D標準品R_f值相同處出現點的部位，即可獲得含鴉膽子素D的洗脫液；?

（6）重結晶：將薄層層析檢測僅在與鴉膽子素D標準品R_f值相同處出現點的合并洗脫液減壓濃縮后，用甲醇充分溶解，過濾，濾液靜置于4℃冰箱中，待結晶析出后，濾出結晶即為鴉膽子素D純品。

5.根據權利要求4所述一種從鴉膽子中提取純化鴉膽子素D的制備方法，其特征在于所述步驟（1）中的鴉膽子為鴉膽子植物的種子、皮、葉中的任一種。

6.根據權利要求4所述一種從鴉膽子中提取純化鴉膽子素D的制備方法，其特征在于所述步驟（5）中若不能獲得獲得純度高的鴉膽子素D洗脫液，可用濕柱法再進行一次分離。