[發明專利]組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜分析方法

無效

• 申請號: 201210437738.5
• 申請日: 2012-11-06
• 公開（公告）號: CN102928498A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 陳煥文;朱亮;顧海巍;王楠楠;張華;鄢飛燕;陳健
• 申請（專利權）人: 東華理工大學
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62
• 代理公司: 江西省專利事務所 36100
• 代理人: 黃新平

技術領域

本發明涉及一種組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜分析方法，特別是一種基于簡單電離裝置來實現樣品的電離，對未預處理的固態復雜樣品進行快速直接質譜分析的方法。

背景技術

質譜技術是一種具有高靈敏度、高特異性及在一些形式下具有高通量特點的化學分析方法，是分析復雜混合物的一種有效工具，能獲取分析物的化學結構等重要分子信息。

復雜樣品的質譜分析一般先要進行繁瑣的樣品預處理過程，因此無法實現對樣品的快速直接分析。傳統的質譜分析技術用于復雜樣品的分析時一般要與氣相色譜或液相色譜聯用，如GC-MS，LC-MS技術。借助色譜技術對復雜樣品高效的分離能力，進而通過質譜技術才能實現對復雜樣品的有效分析，但這些技術無法脫離復雜樣品分析前的繁鎖的預處理過程而實現對復雜樣品的快速、在線、高通量檢測。

目前，用于分析復雜樣品的常用質譜方法有：激光消融電噴霧電離質譜法（LAESI-MS）、電噴霧解吸電離質譜法（DESI-MS）、基質輔助激光解吸電離質譜法（MALDI-MS）、電噴霧激光解吸電離質譜法（ELDI-MS）、電噴霧萃取電離質譜法（EESI-MS）、二次離子質譜（SIMS-MS）等。這些分析技術各具特點，而且不同的技術所能分析的樣品也不盡相同，例如EESI-MS特別適于對氣體或液體樣品進行分析，而DESI-MS對固態樣品表面的分析非常有效。但是上述所列舉的分析技術也有各自的缺點，如MALDI-MS或ELDI-MS對樣品仍具有一定程度的損傷，這些技術所要依賴的高能激光可能會使樣品中某些易分解的物質分解而無法被檢測。

因此，在無需對復雜樣品進行過多預處理的前提下，找到一種較柔軟的（對樣品無損）且依賴于較簡單的實驗裝置就能實現對其進行直接快速質譜分析的技術具有重要的現實意義。

發明內容

本發明的目的就是提供一種不需要對復雜固態樣品進行復雜預處理，且對樣品損傷小，能夠實現對固態復雜樣品快速直接分析的組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜分析方法。

????本發明的技術方案：用鐵架臺等承接裝置將組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜裝置搭好，切取樣品，被分析的固態植物或動物組織的樣品體積為20-200mm³，將石英毛細管直接插入樣品內部且與樣品前端保持一定的距離不插穿樣品，石英毛細管的另一端與微量進樣器相連。石英毛細管插入到樣品內部同時也起到了承載固定樣品的作用，通過調節使毛細管末端水平，且與樣品前端、質譜儀入口保持同軸。微量進樣器內部裝有萃取劑，并由進樣泵控制流速將萃取劑推入到樣品內部。萃取劑可以根據具體的實驗情況選擇性使用，以達到樣品的選擇性萃取，如在植物組織的分析中，可以選擇甲醇、純水、甲醇與水的混合溶液等作為萃取劑，而在分析一些油酯類物質時，則可以選擇極性較小的萃取劑。微量進樣器的進樣針為導電鋼結構，在微量進樣器的進樣針上加上大小可調節的3.0-5.0?kV直流電壓，電壓通過微量進樣器內的萃取劑直接導入到被分析的樣品上。在電場的作用下注入的萃取劑朝著質譜儀入口移動，樣品內部的物質被萃取劑選擇性地萃取、解吸，樣品前端的電場強度最大，會在樣品的前端產生電噴霧效應，從而實現樣品的離子化。離子化的分析物形成噴霧進入質譜儀被檢測分析。

本發明的組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜分析方法，應用領域廣泛，能夠直接快速獲取樣品內部分子的信息，已在植物活體分析（如果實成熟機制、發病機理研究）、組織分析（癌癥手術切除干凈與否的快速判斷）、材料分析（催化的分子機理）等方面進行了初步應用研究。組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜分析方法包括了直接電離、在線分離和選擇性萃取等基本過程，實驗證明該方法是一種裝置簡單、制造成本低、離子化效率高、對樣品損傷作用小的質譜分析的方法。

附圖說明

圖1為本發明組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜分析方法工作原理示意圖；

圖2為在正離子模式下草莓的指紋譜圖；

圖3為在正離子模式下使用不同萃取劑得到的生姜的指紋譜圖；

圖4為在正離子模式下豬的瘦肉組織的指紋譜圖。

具體實施方式

請參閱圖1所示，一種組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜分析方法，所采用的電噴霧萃取電離質譜裝置包括：微量進樣器1、直流電壓2、石英毛細管3、支架、質譜儀，其中a為樣品4前端與質譜儀入口5之間的距離。

以草莓樣品為例來說明組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜分析方法的操作步驟：

1、利用鐵架臺等承接裝置將組織樣品內部電噴霧萃取電離質譜裝置搭好；