[發明專利]串珠鐮刀菌素酶聯免疫檢測試劑盒無效
| 申請號： | 201210436706.3 | 申請日： | 2012-11-06 |
| 公開（公告）號： | CN103808920A | 公開（公告）日： | 2014-05-21 |
| 發明（設計）人： | 杜道林;尚蘇林 | 申請（專利權）人： | 江蘇維賽科技生物發展有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/531 | 分類號： | G01N33/531;G01N33/532 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 212009 江蘇省鎮江市丁*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 串珠 鐮刀 菌素 免疫 檢測 試劑盒 | ||
1.串珠鐮刀菌素酶聯免疫檢測試劑盒的制備，包括洗滌液，顯色液，終止液；其特征在于：包有串珠鐮刀菌素固相抗原的包被板、串珠鐮刀菌素標準品，串珠鐮刀菌素單克隆抗體、串珠鐮刀菌素酶標二抗。
2.串珠鐮刀菌素固相抗原的包被板制作，包括包被原的制作、封閉液的配置、以及孵育；把包被原加入包被液用作固相抗原的包板制作；包被液：稱取1.6?g碳酸鈉加上2.9?g碳酸氫鈉，加雙蒸水至1000?mL，調節pH至9.6；封閉液：稱取1?g?BSA，加到100?mL?PBS緩沖液中；包板時每孔100?μL包板液，37℃下孵育2?h，后取出洗板兩次，加封閉液，每孔180?μL，37℃下孵育1.5?h，取出甩干，加干燥劑2?-?8℃保存。
3.根據權利要求書第一條所述，串珠鐮刀菌素的標準品由高標稀釋而成，稀釋液為PBS緩沖液；0.1M?PBS：1000?mL蒸餾水中加?NaCl?9g，Na2HPO4·12H2O?6g?，NaH2PO4·2H2O?0.4g，?PH：7.2。
4.根據權利要求書第一條所述，串珠鐮刀菌素的酶標二抗的酶由辣根過氧化酶標記。
5.根據權利要求書所述，串珠鐮刀菌素的檢測步驟如下：取包被板，加入標準品/樣本50?μl到對應的微孔中，再加入酶標記物50?μL/孔，然后再加入50μL/孔抗體工作液，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置室溫避光反應30?min；小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，加洗滌液?250?μL?/孔，每次浸泡15～30?s，充分洗滌4～5次，用吸水紙拍干；加入顯色A，B液50?μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25℃避光環境反應15?min；每孔各加50?μL終止液，設定酶標儀在450?nm處，測定OD值（建議用450/630?nm雙波長檢測，在5?min內讀完數據）；從標準曲線中計算樣品中串珠鐮刀菌素的含量。?
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