[發(fā)明專利]一種用于酸性磷酸酶檢測的液體試劑盒和檢測方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201210436202.1 | 申請日： | 2012-11-05 |
| 公開（公告）號： | CN103808712B | 公開（公告）日： | 2017-12-19 |
| 發(fā)明（設計）人： | 杜少卿;蔡錦剛;唐瑋 | 申請（專利權）人： | 深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司 |
| 主分類號： | G01N21/78 | 分類號： | G01N21/78 |
| 代理公司： | 廣州華進聯(lián)合專利商標代理有限公司44224 | 代理人： | 何平 |
| 地址： | 518057 廣東省深圳市南山區(qū)*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 酸性磷酸酶 檢測 液體 試劑盒 方法 | ||
1.一種用于酸性磷酸酶檢測的液體試劑盒，包括基質液和顯色液，
所述基質液和所述顯色液分開存放；
所述基質液含有酸性磷酸酶的底物，緩沖對的兩類物質中的堿性物質和甘氨酸，所述基質液的pH值為8-11；
所述基質液底物選自磷酸酯；
所述基質液中的堿性物質為檸檬酸三鈉或乙酸鈉或磷酸氫二鈉；
所述顯色液含有對所述底物反應后的產(chǎn)物有顯色反應的顯色劑，緩沖對的兩類物質中的酸性物質和甘氨酸，所述顯色液的pH值為1-2；
所述顯色液中顯色劑選自重氮鹽；
所述顯色液中的酸性物質為檸檬酸或乙酸；
所述顯色液還含有Triton X-100和十二烷基硫酸鈉；
所述基質液和所述顯色液混合后得到工作液，所述緩沖對的兩類物質和甘氨酸將所述工作液pH值維持在4-6。
2.根據(jù)權利要求1所述的液體試劑盒，其特征在于，所述磷酸酯為α-萘基磷酸酯。
3.根據(jù)權利要求1所述的液體試劑盒，其特征在于，所述重氮鹽為4-氯-2-甲基苯重氮化鹽。
4.根據(jù)權利要求1所述的液體試劑盒，其特征在于：所述基質液的pH值為10,所述基質液中的堿性物質為檸檬酸三鈉。
5.根據(jù)權利要求1所述的液體試劑盒，其特征在于：所述顯色液的pH值為1.2，所述顯色液中的酸性物質為檸檬酸。
6.一種檢測生物樣本中酸性磷酸酶活性的方法，包括：提供基質液，
所述基質液含有酸性磷酸酶的底物，緩沖對的兩類物質中的堿性物質和甘氨酸，所述基質液的pH值為8-11；
所述基質液底物選自磷酸酯；
所述基質液中的堿性物質為檸檬酸三鈉或乙酸鈉或磷酸氫二鈉；
提供顯色液，所述顯色液含有對所述底物反應后的產(chǎn)物有顯色反應的顯色劑，緩沖對的兩類物質中的酸性物質和甘氨酸，所述顯色液的pH值為1-2；
所述顯色液中顯色劑選自重氮鹽；
所述顯色液中的酸性物質為檸檬酸或乙酸；
所述顯色液還含有Triton X-100和十二烷基硫酸鈉；
所述基質液和所述顯色液混合后得到工作液，所述緩沖對的兩類物質和甘氨酸將所述工作液的pH值維持在4-6；
將待測的含有酸性磷酸酶的生物樣本與所述工作液混合，孵育反應后，檢測吸光度值；
根據(jù)所述吸光度值計算得到所述酸性磷酸酶的活性。
7.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于：所述磷酸酯為α-萘基磷酸酯。
8.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于：所述重氮鹽為4-氯-2-甲基苯重氮化鹽。
9.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于：所述基質液的pH值為10，所述基質液中的堿性物質為檸檬酸三鈉；所述顯色液的pH值為1.2，所述顯色液中的酸性物質為檸檬酸，所述基質液與所述顯色液以2:1混合均勻得到工作液。
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