[發明專利]一種白及種子無菌生產微型種莖的方法

無效

• 申請號: 201210432147.9
• 申請日: 2012-11-01
• 公開（公告）號: CN102907323A
• 公開（公告）日: 2013-02-06
• 發明（設計）人: 謝玲玲
• 申請（專利權）人: 建始縣頤泰生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種白及種子無菌生產微型種莖的方法。

背景技術

白及為蘭科植物白及Bletilla?striata(Thunb．ex?A．Murray)Rchb．f．的干燥塊莖。又名白芨、連及草、箬蘭、甘根、白根、百笠、紫蕙。白及的藥用歷史悠久，是我國傳統中藥。《神農本草經》載：“主治痛腫惡瘡敗疽，傷陰死肌。”《藥性本草》說：“治面上，令人肌滑。”《中華本草》曰：治發背(癰)、瘰癘、撲損、刀箭傷，生肌止痛。《用藥法象》說：“止肺血。”實驗研究證明，白及煎劑、散劑均有止血作用，對實驗性胃及十二指腸穿孔有定的作用，傳統上它對肺結核、矽且、肛裂等癥有較好療效，是歷代醫家治療肺癆的主藥之一。白及也為1977年以后各版《中國藥典》所收載，性微寒、味苦、甘，具有補肺、止血、散風除濕、通竅止痛、消腫排膿、生肌、斂瘡的功能，主要用于治療感冒頭痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻淵、牙痛、白帶、肺傷咳血、衄血、金瘡出血、癰疽腫毒、潰瘍疼痛、湯火灼傷、手足皸裂等。然而，白及為野生藥材，家種品極少，市場供應主要靠野生品來維持。近年來，由于人為的過度采挖和天然生境的破壞，其野生自然資源急劇減少，瀕臨滅絕，被國家列為重點保護的野生藥用植物之一。其種子較小，自然條件下需與真菌共生才能萌發，實生苗的栽培較為困難，而傳統分株、切塊等無性繁殖的方式成活率極低，繁殖難度很大，不可能滿足大規模生產的需要。白及組織培養和種子繁殖技術研究雖然有不少人涉及，但基本上是走培育成幼苗再移栽到田間的技術路線，由于白及組培苗的離開培養環境后，栽培成活困難，限制了其在生產上的應用。

發明內容

本發明的目的是提供了一種白及種子無菌生產微型種莖的方法，實現利用白及種子有性繁殖大量微型種莖，作為繁殖材料。

本發明一種白及種子無菌生產微型種莖的方法，?其特征在于含有以下步驟：

a.種子萌發與無菌苗培養：將白及果實采收后，先用洗衣粉漂洗，后置于2%升汞溶液中消毒，再用無菌水沖洗，然后進行接種；

?b.誘導生根：將步驟a獲得的小苗，轉接到配方為1/2MS+NAA0.2～0.4mg/L的生根培養基上培養，得生根后的白及苗；

c.微型種莖的培養：將步驟b獲得的小苗，轉接到PH值為5.8的1/2MS或MS培養基上培養，得白及微型種莖。

本發明一種白及種子無菌生產微型種莖的方法，其特征在于含有以下步驟：

a.種子萌發與無菌苗培養：將白及果實采收后，先用洗衣粉漂洗，后置于2%升汞溶液中消毒，再用無菌水沖洗，然后進行接種；所述的接種方法是：十字狀切開果實，將白色粉末狀種子彈到經高溫滅菌過的濾紙上，然后適量接種到培養基上；接種后培養成小苗；該培養基的配方組成為KC+100～200g/L馬鈴薯或1/2?MS+10%椰汁或MS+2～4mg6-BA/L+0.2～0.4mgNAA/L，PH值為5.8～6.0；

b.誘導生根：將步驟a獲得的小苗，轉接到配方為1/2MS+NAA0.2～0.4mg/L的生根培養基上；調PH值為5.8左右，置24±2℃，每天光照10小時，光照強度為20000-30000lx下培養得生根后的白及苗；

c.微型種莖的培養：將步驟b獲得的小苗，轉接到PH值為5.8的1/2MS或MS培養基上，置24±2℃，每天光照10小時，光照強度為20000-30000lx下培養得白及微型種莖。

本發明一種白及種子無菌生產微型種莖的方法，其特征在于含有以下步驟：

a.種子萌發與無菌苗培養：將白及果實采收后，先用洗衣粉漂洗20分鐘，后置于2%升汞溶液中消毒20分鐘，再用無菌水沖洗5次，然后進行接種；所述的接種方法是：十字狀切開果實，將白色粉末狀種子彈到經高溫滅菌過的濾紙上，然后適量接種到培養基上；接種后置24±2℃，每天光照10小時，光照強度為20000-30000lx下培養，30天-100天使種子萌發并培養成小苗；該培養基的配方組成為KC+100～200g/L馬鈴薯或1/2?MS+10%椰汁或MS+2～4mg6-BA/L+0.2～0.4mgNAA/L，PH值為5.8～6.0；

b.誘導生根：將步驟a獲得的小苗，轉接到配方為1/2MS+NAA0.2～0.4mg/L的生根培養基上；調PH值為5.8左右，置24±2℃，每天光照10小時，光照強度為20000-30000lx下培養，30天-60天獲得生根后的白及苗；