[發明專利]優化的甘露聚糖酶基因及其重組植物表達載體和應用

有效

• 申請號: 201210431932.2
• 申請日: 2012-11-01
• 公開（公告）號: CN102888419A
• 公開（公告）日: 2013-01-23
• 發明（設計）人: 姚斌;楊培龍;孟昆;張宇宏;徐曉露;袁建華;陳茹梅;孟慶長;張偉
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院飼料研究所
• 主分類號: C12N15/56
• 分類號: C12N15/56;C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00
• 代理公司: 北京市德權律師事務所 11302
• 代理人: 余光軍

1.優化的甘露聚糖酶基因，其特征在于：其核苷酸序列為SEQ?ID?NO.1所示。

2.含有權利要求1所述優化的甘露聚糖酶基因的重組表達載體；優選的，所述重組表達載體是重組植物表達載體。

3.一種重組植物表達載體，其特征在于，包括：啟動子序列、原始的甘露聚糖酶基因或權利要求1所述的優化的甘露聚糖酶基因，信號肽和蛋白體定位序列以及終止子序列。

4.按照權利要求3所述的重組植物表達載體，其特征在于：所述的啟動子為單子葉植物組成型啟動子、單子葉植物誘導型啟動子或單子葉植物組織特異性啟動子。

5.一種構建權利要求3或4所述重組植物表達載體的方法，包括：將信號肽和蛋白體定位序列，原始的甘露聚糖酶基因或權利要求1所述的優化的甘露聚糖酶基因和終止子序列連接在一起后，可操作的連接到啟動子序列之后。

6.一種制備表達甘露聚糖酶的轉基因植物的方法，該方法包括以下步驟：

（1）構建含有原始甘露聚糖酶基因或權利要求1所述優化的甘露聚糖酶基因的重組植物表達載體；

（2）將所構建的重組植物表達載體轉化到受體農作物中，篩選獲得表達甘露聚糖酶的轉基因植物。

7.按照權利要求6所述的方法，其特征在于：所述的重組植物表達載體的構建方法包括：將信號肽和蛋白體定位序列，原始的甘露聚糖酶基因或權利要求1所述的優化的甘露聚糖酶基因和終止子序列連接在一起后，可操作的連接到啟動子序列之后；所述的啟動子為單子葉植物組成型啟動子、單子葉植物誘導型啟動子或單子葉植物組織特異性啟動子。

8.按照權利要求6所述的方法，其特征在于：將所構建的重組植物表達載體與植物選擇標記基因表達載體共同轉化受體作物，選育得到表達甘露聚糖酶而不含篩選標記基因的轉基因作物。

9.按照權利要求8所述的方法，其特征在于：所述的選擇標記基因表達載體為pHP17042Bar。

10.按照權利要求6或8所述的方法，其特征在于：所述的受體農作物為玉米、油菜、大豆或小麥。