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[發明專利]動態高壓微射流-酶解法制備低過敏性β-乳球蛋白方法無效

專利信息
申請號: 201210431181.4 申請日: 2012-11-02
公開(公告)號: CN102960536A 公開(公告)日: 2013-03-13
發明(設計)人: 鐘俊楨;劉成梅;劉偉 申請(專利權)人: 南昌大學
主分類號: A23J3/34 分類號: A23J3/34;A23J3/08
代理公司: 南昌市平凡知識產權代理事務所 36122 代理人: 夏材祥
地址: 330031 江西省*** 國省代碼: 江西;36
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 動態 高壓 射流 解法 制備 過敏性 球蛋白 方法
【權利要求書】:

1.?一種動態高壓微射流-酶解法制備低過敏性β-乳球蛋白方法,其特征是:

(1)按1mg/mL的濃度比例配制β-乳球蛋白溶液,在常溫條件下,取1gβ-乳球蛋白樣品溶于1L二次去離子水中,采用磁力攪拌器在50-80rpm的轉速下攪拌5-10min使蛋白質完全溶解;

(2)采用動態高壓微射流處理步驟(1)所得的β-乳球蛋白溶液,經過160MPa壓力處理,處理次數為3次,收集處理后的樣品進行凍干,得到壓力改性后的β-乳球蛋白樣品;

(3)將步驟(2)所得樣品、10,000U/mg的胰蛋白酶和胰蛋白酶抑制劑分別溶于50mM、pH7.8和離子強度為0.08MNaCl的Tris緩沖液中,濃度分別配制為0.66mM?,0.56μM和8.5μM,備用;

(4)將步驟(3)所配制成的β-乳球蛋白和胰蛋白酶溶液按1:40的酶與底物的比值混合均勻,在37℃恒溫水浴中進行50rpm的轉速攪拌反應30min,反應結束迅速后加入體積比12.5%步驟3所配制好的胰蛋白酶抑制劑終止反應,收集反應后的樣品;

(5)將步驟(4)所得樣品溶液采用截留分子量為20kDda的超濾管,在8000r/min條件下離心10min進行超濾,超濾所得溶液凍干即為低致敏性β-乳球蛋白。

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