[發明專利]一種酶標儀線性關系快速評估的方法

無效

• 申請號: 201210430424.2
• 申請日: 2012-11-01
• 公開（公告）號: CN102928370A
• 公開（公告）日: 2013-02-13
• 發明（設計）人: 米其利;曾婉俐;張濤;高茜;周嵐;李雪梅;夭建華
• 申請（專利權）人: 云南煙草科學研究院
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 楊宏珍

技術領域：

本發明涉及一種酶標儀線性關系快速評估的方法，屬于酶標儀性能評價技術領域。

背景技術：

酶標儀是臨床及實驗室中常用的設備，其檢測結果的準確性和可靠性備受關注。線性關系是酶標儀儀器性能的核心指標之一，也是預防和快速檢查酶標儀設備故障的方法之一。簡易可行的酶標儀線性關系評估方法可有效避免因酶標儀故障問題等客觀原因和檢測人員操作失誤等主觀原因造成的錯誤的檢測結果。

目前，有關酶標儀線性關系評估和校正的方法已有公開報道。如：國家質量監督檢驗檢疫總局于2007年發布了《酶標分析儀檢定規程》（JJG861-2007）[1]，檢定用設備包括交流電壓表、頻率表、兆歐表、微孔酶標板、以及分光光度計，檢定用試劑主要是重鉻酸鉀，適用于酶標分析儀的首次檢定、后續檢定和使用中檢驗。楊青成等[2]采用重鉻酸鉀溶液建立了酶標儀的日常校準方法，經驗證可代替標準濾光片。成軍等[3]采用甲基橙溶液建立了酶標儀性能評價與鑒定的方法。何宗忠等[4]采用酶聯反應試劑建立了酶標儀線性校正的方法。

經文獻檢索，未見與本發明相同的公開報道。

參考文獻：

[1]??JJG–861:?2007.?中華人民共和國國家計量檢定規程?酶標分析儀[S].

[2]??楊青成,?陳艷春,?侯治兵,?等.?酶標儀校準方法探討[J].?臨床血液學雜志,?2011,?24(4):?212-215.

[3]??成軍,?孫關忠,?鄭懷競.?酶標儀性能評價與鑒定方法的理論基礎及其解釋[J].?陜西醫學檢驗,?1998,?13(4):?12-14.

[4]?何宗忠,?王強,?王大釗,?等.?介紹一種酶標儀線性校正的簡易方法[J].?現代檢驗醫學雜志,?2007,?22(5):?7-8.

發明內容：

本發明的目的在于提供一種酶標儀線性關系快速評估的方法，為酶標儀的性能評價提供技術支持。

本發明的技術解決方案是：根據朗伯-比爾定律，中性紅溶液在特定的吸收波長處，其吸光強度與稀釋濃度成正比的特性，在酶標儀波長540?nm處，讀取各孔的吸光度值，進行線性關系分析。

本發明的目的通過下述技術步驟來實現：

1、采用去離子水將中性紅染料配制成6個濃度的溶液，分別為：0.78、1.56、3.13、6.25、12.5、25?μg/mL。

2、將配制的中性紅溶液加入到96孔細胞培養板中，每孔200?μL，每個濃度做8孔平行。

3、在酶標儀波長540?nm處，讀取各孔的吸光度值。

4、線性關系分析：采用一元線性回歸的數據擬合方式，得出線性回歸方程和相關系數。

本發明方法的優點在于：操作簡單易行，經濟實用，能夠快速實現酶標儀線性關系的評估，為酶標儀的性能評價提供技術支持。

附圖說明：

圖1??中性紅溶液與吸光度值的散點和線性回歸圖。

具體實施方式：

1.實驗材料：中性紅染料，為實驗室常用試劑；容量瓶；移液管；96孔細胞培養板。

2.主要實驗器材：酶標儀Bio-Rad?680型；水浴鍋；移液槍。

3.實驗原理：根據朗伯-比爾定律，中性紅溶液在特定的吸收波長處，其吸光強度與稀釋濃度成正比的特性，在酶標儀波長540?nm處，讀取各孔的吸光度值，進行線性關系分析。

4.實驗方法：將6個不同濃度的中性紅溶液加入到96孔細胞培養板內，在540?nm波長處檢測每孔的吸光度值，采用一元線性回歸的數據擬合方式，得出線性回歸方程和相關系數。

具體步驟如下：

a、打開酶標儀，進行儀器預熱。

b、采用去離子水將中性紅染料配制濃度為1?mg/mL的溶液，由于中性紅是一種結晶性染料，配制時應使之充分溶解后再用容量瓶定容。

c、采用去離子水將1?mg/mL的中性紅溶液稀釋成6個濃度的溶液，分別為：0.78、1.56、3.13、6.25、12.5、25?μg/mL，并將之充分混勻以保證溶液的均一性。

d、將以上配制的6個濃度的中性紅溶液加入到96孔細胞培養板中，每孔200?μL，每個濃度做8孔平行。

e、在酶標儀波長540?nm處，讀取各孔的吸光度值，見表1。由表1知：在酶標儀540?nm波長處，中性紅溶液的吸光度值隨著濃度的增加而增加，呈顯著的正比關系。